Diferencia entre la cromatografía de afinidad e intercambio iónico
El diferencia clave Entre la cromatografía de afinidad e intercambio iónico es que Podemos usar la cromatografía de afinidad para separar componentes cargados o no cargados en una mezcla, mientras que podemos usar la cromatografía de intercambio iónico para separar los componentes cargados en una mezcla.
La cromatografía es una técnica que podemos usar para separar los componentes deseados en una mezcla. Existen diferentes tipos, como cromatografía líquida, cromatografía de gases, etc. La cromatografía de afinidad y la cromatografía de intercambio iónico son dos subcategorías de cromatografía líquida. Además, en estas técnicas, hay dos fases. A saber, son la fase estacionaria y la fase móvil. El propósito de estas técnicas es separar los componentes, dependiendo de la unión de los componentes, en la fase móvil a la superficie de la fase estacionaria.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la cromatografía de afinidad?
3. ¿Qué es la cromatografía de intercambio iónico?
4. Comparación de lado a lado: cromatografía de intercambio iónico de afinidad vs iónico en forma tabular
5. Resumen
¿Qué es la cromatografía de afinidad??
La cromatografía de afinidad es una técnica bioquímica que utilizamos para separar los componentes en una mezcla dependiendo de las interacciones entre estos componentes.
Las interacciones que utilizamos en este caso incluyen los siguientes:
- Interacciones antígeno-anticuerpo
- Interacciones enzimáticas-sustratadas
- Interacciones receptor-ligando
- Interacciones de ácido nucleico proteína
En esta técnica, utilizamos las propiedades moleculares de las moléculas para esta técnica de separación. Aquí, permitimos que el compuesto deseado interactúe con una fase estacionaria a través de enlaces de hidrógeno, interacción iónica, puentes disulfuro, interacción hidrófoba, etc. Las moléculas que no interactúan con la fase estacionaria se eluirán primero. Por lo tanto, podemos separarlo de la mezcla. El compuesto deseado permanecerá unido a la fase estacionaria. Por lo tanto, podemos separarlo usando un solvente eluyente y hacer que sea elato para separarlo también.
Figura 01: una columna cromatográfica
La cromatografía de afinidad es útil en la purificación y la concentración de una sustancia de una mezcla utilizando una solución de tampón. Además, es útil para reducir las sustancias no deseadas en una mezcla. Al considerar el aparato que usamos para este proceso, debemos usar una columna llena de nuestra fase estacionario. Luego, debemos cargar la fase móvil que contiene las biomoléculas que vamos a separar. A continuación, permita que se unan con la fase estacionaria. A partir de entonces, utilizando un tampón de lavado, podemos separar las biomoléculas no objetivo, pero las moléculas objetivo deberían tener una alta afinidad por la fase estacionaria para tener éxito en el proceso de separación.
¿Qué es la cromatografía de intercambio iónico??
La cromatografía iónica es una forma de cromatografía líquida en la que podemos analizar sustancias iónicas. A menudo, lo usamos para analizar aniones y cationes inorgánicos (i.mi. aniones de cloruro y nitrato y potasio, cationes de sodio). Aunque es menos común, también podemos analizar los iones orgánicos. Además, podemos usar esta técnica para la purificación de proteínas porque las proteínas son moléculas cargadas a ciertos valores de pH. Aquí, utilizamos una fase estacionaria sólida a la que las partículas cargadas pueden unir. Por ejemplo, podemos usar los copolímeros de resina poliestireno-divinilbenceno como soporte sólido.
Figura 02: Fases de cromatografía de intercambio iónico
Para explicar esto más allá, la fase estacionaria tiene iones fijos como aniones de sulfato o cationes cuaternarios de amina. Cada uno de esto debe asociarse con un contraión (un ion con carga opuesta), si queremos mantener la neutralidad de este sistema. Aquí, si el contador es un catión, entonces nombramos el sistema como una resina de intercambio de cationes. Pero, si el contraión es un anión, el sistema es una resina de intercambio de aniones.
Hay cinco fases principales en un proceso de intercambio iónico;
- Etapa inicial
- Adsorción de Target
- Comienzo de la elución
- Fin de la elución
- Regeneración
¿Cuál es la diferencia entre afinidad y cromatografía de intercambio iónico??
La cromatografía de afinidad es una técnica bioquímica que utilizamos para separar los componentes en una mezcla dependiendo de las interacciones entre estos componentes, mientras que la cromatografía iónica es una forma de cromatografía líquida en la que podemos analizar sustancias iónicas. Por lo tanto, la principal diferencia entre la cromatografía de afinidad y intercambio iónico es que podemos usar la cromatografía de intercambio iónico solo para la separación de sustancias iónicas, mientras que la cromatografía de afinidad es capaz de separar las partículas cargadas y no cargadas. Al considerar el principio de funcionamiento, la diferencia entre la cromatografía de afinidad y intercambio iónico es que la cromatografía de afinidad procede debido al hecho de que las moléculas objetivo tienen una alta afinidad por la fase estacionaria. Sin embargo, para la cromatografía de intercambio iónico, las moléculas objetivo tienen una carga opuesta a la de la superficie de la fase estacionaria.
La siguiente infografía presenta la diferencia entre la cromatografía de afinidad e intercambio iónico como una comparación de lado a lado.
Resumen -Cromatografía de intercambio de afinidad vs ión
En resumen, la cromatografía de afinidad e intercambio iónico son dos formas de técnicas cromatográficas líquidas. La diferencia clave entre la cromatografía de afinidad y intercambio iónico es que podemos usar la cromatografía de afinidad para separar los componentes cargados o no cargados en una mezcla, mientras que podemos usar la cromatografía de intercambio iónico para separar los componentes cargados en una mezcla.
Referencia:
1. "Cromatografía de afinidad."Wikipedia, Fundación Wikimedia, 5 de octubre. 2018. Disponible aquí
2. Bibliotecas. "Cromatografía de intercambio de iones."Bibliotecas de química, Librettexts, 29 DEC. 2016. Disponible aquí
Imagen de cortesía:
1."Resina de níquel" de PDCOOK - Trabajo propio, (CC By -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
2."IEX" de Daliak (dominio público) a través de Commons Wikimedia
