Diferencia entre BCA y Bradford Assay

Diferencia entre BCA y Bradford Assay

El Diferencia clave entre BCA y Bradford Assay es que el ensayo de BCA requiere mucho tiempo y es menos preciso, mientras que el ensayo de Bradford es rápido y preciso.

El ensayo de BCA y Bradford son dos métodos de ensayo de determinación de concentración de proteínas. Estos dos ensayos tienen diferentes principios de ensayo y diferencias en sus precisiones.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es el ensayo de BCA?
3. ¿Qué es el ensayo de Bradford?
4. BCA vs Bradford Ensayo en forma tabular
5. Resumen - BCA vs Bradford Ensay

¿Qué es el ensayo de BCA??

Ensayo BCA o ensayo de ácido bicinchonínico es un ensayo bioquímico útil para determinar la concentración total de proteína en una solución. Este método también se nombra como Ensayo de Smith Después de su inventor, Paul K. Herrero. Este método analítico muestra similitudes con el ensayo de proteínas Lowry, el ensayo de proteínas Bradford o el reactivo de Biuret. Podemos observar la concentración total de proteína en una muestra dada a través de un cambio de color de la solución de muestra, que va de verde a púrpura. Este cambio de color ocurre en proporción al contenido de proteínas. A partir de entonces podemos usar una técnica de colorimétricos para analizar la intensidad del color y el contenido de proteínas en la muestra.

Método BCA de estimación de proteínas

Al considerar el mecanismo del ensayo BCA, la solución BCA típica contiene una solución altamente alcalina con un pH de casi aproximadamente 11.25, y los ingredientes en esta solución incluyen ácido bicinchonínico, carbonato de sodio, bicarbonato de sodio, tartrato de sodio y pentahidrato de sulfato de cobre (II). Este ensayo depende principalmente de dos reacciones químicas: la reducción del cobre (II) al cobre (I) por los enlaces péptidos en proteínas y quelación de dos moléculas de ácido bicinchonínico con ion de cobre (I), lo que resulta en un complejo color púrpura que puede absorber la luz a 562 nm de longitud de onda. En la primera reacción, la cantidad de cobre (II) reducida por los enlaces péptidos es proporcional a la cantidad de proteína en la muestra.

¿Qué es el ensayo de Bradford??

El ensayo de Bradford es un método analítico espectroscópico útil para medir la concentración de proteína en una solución. Este método fue desarrollado por Marion M. Bradford en 1976, y es un método relativamente rápido y preciso.

Reacción de color de proteínas y reactivos de Bradford

Podemos usar este método para determinar la concentración de la cantidad de proteína en una muestra. La reacción química que tiene lugar en la muestra durante este ensayo depende únicamente de la composición de aminoácidos de la proteína en la muestra.

Método de Bradford de estimación de proteínas

Al considerar el método de este ensayo, es un ensayo de proteína colourimétrica que se basa en el cambio de absorbancia del tinte llamado Coomassie brillante azul G-250. En general, este tinte existe en tres formas como forma aniónica (azul), forma neutral (verde) y forma catiónica (roja). Por lo tanto, en condiciones ácidas, el tinte cambia su color de rojo a azul. Esto se debe a la unión de la proteína con el tinte. Por el contrario, si no hay proteína para unirse con el tinte, el cambio de color no aparece, la solución obtiene un color rojo marrón rojo. Este tinte es capaz de formar un complejo fuerte y no covalente con el grupo carboxilo de la proteína a través de las fuerzas de van der Waal y las atracciones electrostáticas.

¿Cuál es la diferencia entre el ensayo de BCA y Bradford??

El ensayo de BCA y Bradford son dos métodos de ensayo de determinación de concentración de proteínas. Estos dos ensayos tienen diferentes principios de ensayo y diferencias en sus precisiones. La diferencia clave entre el ensayo BCA y Bradford es que el ensayo de BCA es lento y menos precisa, mientras que el ensayo de Bradford es rápido y preciso.

La siguiente infografía resume las diferencias entre el ensayo de BCA y Bradford en forma tabular.

Resumen -BCA vs Bradford Ensay

El ensayo BCA o el ensayo de ácido bicinconínico es un ensayo bioquímico útil para determinar la concentración total de proteína en una solución. El ensayo de Bradford es un método analítico espectroscópico útil para medir la concentración de proteína en una solución. La diferencia clave entre el ensayo BCA y Bradford es que BCA requiere mucho tiempo y es menos precisa, mientras que el ensayo de Bradford es rápido y preciso.

Referencia:

1. "Ensayo de proteínas de Bradford."Biosciencias experimentales, Universidad de Rice.

Imagen de cortesía:

1. "Ensayo de proteínas Bradford" por Helito - Trabajo propio (CC BY -SA 4.0) a través de Commons Wikimedia
2. "BSA Standard Curve" de Alexiego - Trabajo propio (CC By -SA 4.0) a través de Commons Wikimedia