Diferencia entre la electroforesis capilar y la electroforesis en gel

Diferencia clave: electroforesis capilar vs electroforesis en gel
 

La electroforesis es una técnica que se utiliza para separar biomoléculas basadas en la carga de partículas, el tamaño de partícula y la forma de las partículas. La migración de la molécula, conocida como movilidad electroforética, Depende del tipo de polímero/gel utilizado, su tamaño de poro, el voltaje provisto, el tiempo de ejecución y la relación superficial/volumen. Existen diferentes tipos de técnicas de electroforesis basadas en el tipo de biomolécula utilizada. El primer tipo de electroforesis inventada fue la electroforesis de papel donde se usó un papel de nitrocelulosa como medio para la separación de biomoléculas. El principio de la electroforesis en gel donde se usaron diferentes geles de tamaño de poro para separar biomoléculas, se inventó más tarde. La técnica de electroforesis en gel se modificó aún más para mejorar la precisión de la técnica, y una de esas modificaciones es la electroforesis capilar. La diferencia clave entre la electroforesis capilar y la electroforesis en gel es que La electroforesis en gel se realiza en un plano vertical u horizontal usando un gel de polímero de tamaño de poro estándar, mientras que la electroforesis capilar se realiza en un tubo capilar con un líquido de polímero o un gel.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la electroforesis en gel?
3. ¿Qué es la electroforesis capilar?
4. Similitudes entre la electroforesis capilar y la electroforesis en gel
5. Comparación lado a lado: electroforesis capilar frente a electroforesis en gel en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es la electroforesis en gel??

La electroforesis en gel es una técnica utilizada para separar principalmente ácidos, proteínas o aminoácidos nucleicos según su carga, tamaño y forma. Esta técnica utiliza un gel físico, que es una sustancia de polímero, como medio de separación. Los geles más comúnmente utilizados son agarosa (para la separación del ácido nucleico) y la poliacrilamida (para la separación de proteínas). El aparato electroforético de gel contiene la bandeja de fundición de gel para preparar el gel, fundir peines para preparar los pozos, el tanque de amortiguación, los electrodos - positivo (ánodo) y negativo (cátodo) y la unidad de suministro de voltaje. Moléculas como el ADN o el ARN, que se cargan negativamente, se mueven del cátodo al ánodo y las moléculas que se cargan positivamente el movimiento viceversa. La preparación de gel se realiza de acuerdo con el requisito. Si se requiere una alta resolución o separación de moléculas, se debe preparar un gel de alta concentración con un tamaño de poro menor. Las moléculas separadas en la matriz de gel se observan después de una técnica de tinción. Las moléculas separadas aparecen como bandas en la matriz de gel.

Figura 01: electroforesis en gel

La electroforesis en gel se usa en diagnósticos moleculares, como las huellas dactilares de ADN para determinar la presencia de un fragmento particular de ADN/ARN o una proteína. La electroforesis en gel también determina la pureza de la muestra de biomolécula extraída. La electroforesis en gel se realiza como un paso preliminar para in e hibridación y como análisis confirmatorio después de la secuenciación.

¿Qué es la electroforesis capilar??

La electroforesis capilar es una modificación de la electroforesis en gel que utiliza el mismo principio de separación basado en la carga, tamaño de la molécula, pero se realiza en un tubo capilar con una sustancia de gel o un polímero líquido. Los capilares se preparan de sílice fusionada, y cada tubo capilar tiene un diámetro interno de 50-100 μm y tiene 25-100 cm de longitud. Las muestras se inyectan en el tubo capilar que contiene el material del polímero y se separan mucho rápidamente que la electroforesis en gel convencional. El sistema capilar está bien protegido dentro de una chaqueta aislante que protege la muestra de cualquier contaminación. Los capilares se pueden llenar con polímeros líquidos como la hidroxietilcelulosa o los geles de alta resolución como la poliacrilamida. La electroforesis capilar proporciona una mayor resolución; Por lo tanto, la separación es más precisa. La electroforesis capilar utiliza un sistema de detector automatizado a través del análisis espectrofotométrico. Esto se debe a la mayor relación de superficie a volumen.

Figura 02: electroforesis capilar

La electroforesis capilar se usa en situaciones como en forense donde se requiere mayor precisión y no se usa comúnmente, ya que es una técnica costosa.

¿Cuáles son las similitudes entre la electroforesis capilar y la electroforesis en gel??

• La separación de moléculas en ambas técnicas se basa en la carga y el tamaño de la molécula.
• Ambas técnicas pueden usarse para separar tanto los ácidos nucleicos como las proteínas.
• El volumen de muestra de ambas técnicas es el mismo.
• Ambas técnicas usan un búfer para facilitar la separación.

¿Cuál es la diferencia entre la electroforesis capilar y la electroforesis en gel??

Resumen - electroforesis capilar vs electroforesis en gel

El diagnóstico molecular juega un papel importante en el mundo científico. Identificación y purificación de ADN, ARN y proteínas son pasos críticos en los procedimientos de diagnóstico. La electroforesis es una técnica que separa e identifica biomoléculas tanto en la electroforesis en gel como en la electroforesis en gel capilar muy avanzada. La electroforesis en gel se realiza en un plano vertical u horizontal usando un gel de polímero de tamaño de poro estándar, mientras que la electroforesis capilar se realiza en un tubo capilar con un líquido de polímero o un gel. Esta es la diferencia entre la electroforesis capilar y la electroforesis en gel. Al finalizar la técnica de electroforesis, las biomoléculas se procesan adicionalmente para obtener información de mayor nivel a través de la hibridación o mediante técnicas como las huellas dactilares.

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Referencias:

1. Durney, Brandon C., et al. "Electroforesis capilar aplicada al ADN: determinación y estructura de aprovechamiento y estructura para avanzar en bioanálisis (2009-2014)."Química analítica y bioanalítica, Springer Berlin Heidelberg, 2015, disponible aquí. Consultado el 28 de agosto. 2017.
2. "Electroforesis."Universidad de Leicester, 8 de enero. 2009, disponible aquí. Consultado el 28 de agosto. 2017.
3. "Electroforesis en gel."Khan Academy, disponible aquí. Consultado el 28 de agosto. 2017.

Imagen de cortesía:

1. "Electroforesis en gel de agarosa de ADN" por la Escuela de Recursos Naturales de Ann Arbor - ADN Lab (CC por 2.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Esquema de instrumentos de electroforesis en gel capilar" por Chem4066sp13 - Trabajo propio (CC BY -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia