Hay dos tipos principales de bibliotecas de ADN construidas por científicos que utilizan técnicas de ingeniería genética. Esos son la biblioteca de ADNc y la biblioteca genómica. El diferencia clave Entre el ADNc y la biblioteca genómica es que La biblioteca de ADNc contiene el ADN complementario clonado de ARNm total de un organismo, mientras que la biblioteca de ADN genómico contiene los fragmentos clonados de todo el genoma de un organismo. La biblioteca de ADN genómico es más grande que la biblioteca de ADNc.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la biblioteca de ADNc?
3. ¿Qué es la biblioteca genómica?
4. Comparación de lado a lado - Biblioteca Genómica de ADNc vs
5. Resumen
Una biblioteca de ADN genómico es una colección de clones que llevan los fragmentos del ADN genómico total de un organismo. Contiene todo el ADN genómico de ese organismo, incluidas las secuencias de codificación y no codificación. La construcción de una biblioteca genómica es realizada por la tecnología de ADN recombinante seguida de clonación (ingeniería genética). Hay diferentes pasos involucrados en la construcción como se muestra en la Figura 01. El proceso comienza con el aislamiento de ADN genómico. Usando un protocolo de extracción de ADN adecuado, se debe aislar el ADN genómico total de un organismo. Entonces el ADN debe convertirse en tamaños manejables o en los fragmentos específicos mediante endonucleasas de restricción (enzimas de corte de ADN). El ADN fragmentado debe insertarse en vectores utilizando ligasas de ADN (enzimas de unión de ADN). Un vector es un organismo autorriquetado. Los plásmidos y bacteriófagos son vectores de uso común en la tecnología de ADN recombinante. Estos vectores ligados se conocen como moléculas de ADN recombinantes, ya que llevan secuencias de ADN tanto propias como insertadas. Los vectores recombinantes se agregan a una bacteria huésped y se realizan para absorber los vectores recombinantes dentro de la célula bacteriana. Las bacterias con vectores recombinantes (plásmidos) deben cultivarse en un medio de cultivo. Durante la multiplicación bacteriana, el ADN bacteriano, junto con los plásmidos recombinantes, replican sus genomas y produce clones. Estos clones contienen todo el genoma del organismo fuente. Por lo tanto, se llama biblioteca genómica. Los plásmidos se pueden separar fácilmente del ADN cromosómico bacteriano para construir la biblioteca genómica de ese organismo. Si un organismo en particular contiene genes interesados, es fácil detectarlo en la biblioteca genómica mediante hibridación utilizando sondas moleculares (marcadores).
Las bibliotecas genómicas son importantes para estudiar la estructura y función genómica, genes específicos, ubicación de genes, mapeo de genes, mutaciones, secuenciación génica, identificación de genes terapéuticos nuevos, etc.
Figura_1: Construcción de una biblioteca genómica
Una biblioteca de ADNc es una colección de clones de ADN complementario (ADNc) sintetizados a partir de ARNm total de un organismo. El procedimiento de construcción implica diferentes pasos. La purificación del ARNm total de un organismo es el primer paso involucrado. El ARNm aislado se convierte en hebras de ADNc mediante un proceso llamado transcripción inversa. La transcripción inversa se facilita por una enzima llamada transcriptasa inversa. Utiliza un pequeño cebador de 3 'e inicia la síntesis de la primera cadena de ADNc complementaria a la cadena de ARNm de plantilla. El ADNc de doble cadena resultante se convierte en fragmentos más pequeños utilizando endonucleasas de restricción e insertados en vectores adecuados. Estas moléculas recombinantes construidas se agregan a un organismo huésped y se cultivan en un medio de cultivo para producir clones. La colección de clones que contienen fragmentos de ADNc de un organismo se conoce como una biblioteca de ADNc. El ARNm maduro completamente en rodajas no contiene intrones y regiones reguladoras. Por lo tanto, los fragmentos no codificantes no están presentes en las bibliotecas de ADNc a diferencia de una biblioteca genómica.
Las bibliotecas de ADNc son importantes para el análisis de regiones de codificación, funciones génicas, expresión de genes, etc.
Figura_2: construcción de una biblioteca de ADNc
ADNc vs Biblioteca genómica | |
La biblioteca de ADNA es una colección de los clones que llevan el ADN complementario al ARNm de un organismo | Genomic Library es una colección de clones que llevan el ADN genómico total de un organismo. |
Codificación versus secuencias no codificantes | |
La biblioteca de ADNc contiene solo las secuencias de codificación; no contiene intrones. | La biblioteca genómica consta de todo el ADN genómico, incluido el ADN no codificante (intrones y regulador). |
Tamaño | |
La biblioteca de ADNc es pequeña. | La biblioteca genómica es grande. |
Material de partida | |
El material de partida es ARNm | El material de partida es ADN. |
Participación de la transcripción inversa. | |
La transcripción inversa ocurre en la primera síntesis de cadenas de ADNc. | La transcripción inversa no ocurre. |
La biblioteca genómica representa una población de clones que llevan el ADN genómico total fragmentado de un organismo. La biblioteca de ADNc representa la población de clones con ADN complementario del ARNm total de un organismo. Un clon de ADNc contiene solo las secuencias encontradas en el ARNm, mientras que el clon genómico contiene las secuencias de todo el genoma. Esta es la diferencia entre ADNc y Biblioteca Genómica.
Referencia:
1. Haneef, Deena T Kochunnijazir. "Diferencia entre la biblioteca genómica y de ADNc."Diferencia entre la biblioteca genómica y de ADNc. norte.pag., norte.d. Web. 15 de febrero. 2017
2. Stekel, Dov J., Yoav Git y Francesco Falciani. "La comparación de la expresión génica de múltiples bibliotecas de ADNc."Investigación del genoma. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Dec. 2000. Web. 16 de febrero. 2017
3. “Pantallas de la biblioteca genómica para genes involucrados en la tolerancia a N-butanol en Escherichia coli."Pantallas de la biblioteca genómica para genes involucrados en la tolerancia a N-butanol en Escherichia coli. norte.pag., norte.d. Web. 16 de febrero. 2017
Imagen de cortesía:
1. "Formación de una biblioteca de ADNc" de PhD Dre en el inglés Wikipedia (CC By-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Construcción de la Biblioteca Genómica" de Aluquette - Trabajo propio (CC BY -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia