El diferencia clave Entre Elisa competitiva y no competitiva es que ELISA competitivo utiliza un antígeno de inhibición, mientras que el ELISA no competitivo no utiliza un antígeno de inhibición para el ensayo.
El ensayo inmunosorbente ligado a enzimas (ELISA) es un ensayo inmunológico que detecta varios objetivos como anticuerpos, antígenos, proteínas y glucoproteínas. Es un método rápido y simple para realizar. Por lo tanto, se usa más a menudo con fines de investigación y diagnóstico. ELISA implica el uso de enzimas y la unión específica de anticuerpos y antígeno. Basado en cómo ocurren las reacciones, hay cuatro tipos de ELISA: ELISA directa, ELISA indirecta, ELISA de sándwich e ELISA de inhibición. ELISA directo, indirecto y sándwich son tipos de ELISA no competitiva, mientras que la inhibición ELISA es un tipo de ELISA completa. El objetivo principal de este artículo es discutir la diferencia entre ELISA competitiva y no competitiva.
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la Elisa competitiva?
3. ¿Qué es la Elisa no competitiva?
4. Similitudes entre elisa competitiva y no competitiva
5. Comparación de lado a lado: ELISA competitivo frente a ELISA no competitiva en forma tabular
6. Resumen
ELISA competitivo mide la concentración de antígeno en una muestra a través de la detección de la interferencia de la señal. Aquí, el ensayo usa un antígeno inhibidor. Por lo tanto, es un tipo de inhibición Elisa. Durante este procedimiento, los antígenos presentes en la muestra compiten con el antígeno de referencia seleccionado para unirse a una cantidad específica de anticuerpo marcado. Además, este procedimiento se inicia con la incubación de la muestra, con la cantidad excesiva de anticuerpo marcado. Además, el antígeno de referencia debe recubrirse en una placa de ensayo de pozo múltiple. Entonces la mezcla de muestra debe agregarse a la placa de ensayo que contiene el antígeno de referencia. Los anticuerpos libres se unirán al antígeno de referencia dependiendo de la cantidad de antígeno en la muestra. Por lo tanto, si hay más antígeno de muestra presente, se detectará menos antígeno de referencia. Por lo tanto, crea una señal más débil.
Figura 01: Elisa
En contraste, cuando la muestra contiene menos cantidad de antígeno, cada vez más antígeno de referencia ocuparán los anticuerpos y darán una señal fuerte. Dado que el ELISA competitivo da una señal más fuerte cuando la muestra contiene una baja cantidad de antígenos, el ELISA competitivo es un ensayo muy sensible, incluso para muestras con una pequeña cantidad de antígenos.
En algunos kits ELISA competitivos, se usa un antígeno marcado en lugar de un anticuerpo marcado. Aquí, el antígeno marcado y el antígeno de muestra competirán por la unión al anticuerpo primario. Del mismo modo, cuando la cantidad de antígeno en la muestra es baja, la cantidad de antígeno marcado que se une a los anticuerpos será mayor y creará una señal más fuerte.
Entre los cuatro tipos de ELISA, tres tipos son ELISA no competitivos. Son Elisa Direct Elisa, Elisa indirecta y el sándwich Elisa. Los tres formatos funcionan bajo el principio común de ELISA con ligeras diferencias en sus metodologías.
ELISA directo utiliza un anticuerpo primario marcado con una enzima. Por lo tanto, no requiere un anticuerpo secundario. Por lo tanto, el ELISA directo es más rápido que otros tipos de ELISA. El anticuerpo primario se unirá directamente al antígeno objetivo inmovilizado que está presente en la placa. Por lo tanto, la reacción enzima-sustrato se llevará a cabo, produciendo una señal visible.
Figura 02: Sandwich Elisa
A diferencia del ELISA directo, el ELISA indirecto utiliza un anticuerpo primario sin etiquetar y un anticuerpo secundario marcado con enzima. Una vez que el anticuerpo primario se une al antígeno inmovilizado, el anticuerpo secundario se une al anticuerpo primario. La enzima en el anticuerpo secundario reaccionará con el antígeno y producirá una señal visible. Sandwich Elisa es diferente a la Elisa directa e indirecta. Aquí, el anticuerpo se inmoviliza a la pared de la placa de ensayo.
ELISA competitivo es un tipo de ELISA que se basa en la finalización entre el antígeno analito y el antígeno marcado para una cantidad limitada de anticuerpo específico. Por otro lado, no existe dicha competencia entre el antígeno de interés y el antígeno de referencia en ELISA no competitiva. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre ELISA competitiva y no competitiva. Del mismo modo, el ELISA competitivo es un ELISA de inhibición, mientras que el ELISA no competitivo no es una inhibición Elisa. Por lo tanto, esta también es una diferencia entre la Elisa competitiva y no competitiva.
Además, el ELISA competitivo es más adecuado para medir una baja cantidad de antígeno de interés. Es un método sensible. Por otro lado, el ELISA no competitivo no depende del número de antígenos presentes en una muestra. Por lo tanto, esta también es una diferencia entre ELISA competitiva y no competitiva.
A continuación, la infografía explica la diferencia entre ELISA competitiva y no competitiva en comparación.
ELISA competitivo y no competitivo son los dos tipos principales de ensayos inmunosorbentes vinculados a ELISA o enzimas. Al resumir la diferencia entre ELISA competitivo y no competitivo, el ELISA competitivo se basa en la competencia entre antígeno de interés y antígeno de referencia hacia la cantidad limitada de anticuerpos. Por lo tanto, el ELISA competitivo también se nombra como inhibición Elisa. Por otro lado, el ELISA no competitivo no depende de la competencia entre los antígenos objetivo y los antígenos de referencia. Utiliza un exceso de anticuerpo específico etiquetado para el analito de interés. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre ELISA competitiva y no competitiva. Elisa, Elisa y Elisa de Sandwich Direct ELISA son los tres tipos principales de ELISA no competitiva.
1. Bio-Rad. “Tipos de ELISA | Bio-Rad."Bio, disponible aquí.
2. "Cuatro tipos de ELISA."Cusabio Life Science: su socio de ciencias de biología, disponible aquí.
"Elisa tipus" de Carolfv333 - Trabajo propio (CC By -SA 4.0) Commons Wikimedia.
"Inmunoensayo Sandwich, Elisa" de Nickct - Trabajo propio (CC By -Sa 3.0) a través de Commons Wikimedia