Diferencia entre elisa directa e indirecta
Diferencia clave: ELISA directo vs indirecto
Un inmunoensayo ligado a enzimas (ELISA), también conocido como inmunoensayo enzimático, es una prueba serológica que detecta anticuerpos en la sangre. Se utiliza como una herramienta de diagnóstico para averiguar si el paciente ha estado expuesto a un tipo particular de virus u otro agente infeccioso (antígeno) y si el cuerpo ha producido anticuerpos contra la infección. ELISA también puede identificar las infecciones pasadas y actuales. Por lo tanto, el ELISA a menudo es utilizado como prueba previa por los médicos antes del análisis en profundidad de las enfermedades. Esta prueba se puede realizar en el laboratorio tomando una muestra de sangre del paciente. Hay dos tipos de prueba de ELISA: Elisa directa e Elisa indirecta. La diferencia clave entre ELISA directa e indirecta es que Elisa indirecta es más sensible y requiere la adición de un anticuerpo secundario mientras Elisa directa es menos sensible y solo usa un anticuerpo primario.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es directo? Elisa
3. ¿Qué es indirecto? Elisa
4. Comparación de lado a lado - ELISA directo vs indirecto
5. Resumen
¿Qué es directo? Elisa?
ELISA es una prueba de diagnóstico de enfermedad realizada para identificar la presencia de antígenos o anticuerpos particulares en la sangre. Se hace como un ensayo de placa. Utiliza anticuerpos vinculados con enzimas fácilmente analizadas. La presencia de los antígenos en la unión de muestra de suero con anticuerpos específicos vinculados con enzimas. En el paso final, se agrega un sustrato específico para reaccionar con la enzima. La enzima convierte el sustrato en un producto de color o productor de señal. El cambio de color en el sustrato químico revela la presencia de un anticuerpo particular en la muestra de suero. La prueba directa de ELISA usa solo un anticuerpo primario vinculado a la enzima. Al unirse al antígeno, cambia rápidamente el color, lo que indica la presencia del agente infeccioso en la sangre. Sin embargo, la intensidad de las señales es más débil en ELISA directo, ya que los epítopos se limitan a la unión de los antígenos. Por lo tanto, el ELISA directo es menos sensible en comparación con el ELISA indirecto.
Figura 01: Prueba directa de ELISA
¿Qué es indirecto? Elisa?
ELISA se puede realizar utilizando dos tipos de anticuerpos, a saber; anticuerpo primario y anticuerpo secundario. La herramienta ELISA indirecta utiliza ambos tipos de anticuerpos para amplificar las señales para una mejor detección. La técnica indirecta de ELISA se realiza de la siguiente manera.
- Las placas se incuban con antígenos y se lavan para bloquear la unión inespecífica.
- Luego se agregan y se lavan los anticuerpos primarios.
- Se agregan y se lavan el anticuerpo secundario unido a la enzima.
- Se agrega un sustrato y se deja reaccionar con enzimas.
- Se detectan señales y se identifica la presencia o ausencia del antígeno específico en la muestra.
En la prueba ELISA indirecta, varios anticuerpos secundarios pueden unirse a un solo anticuerpo primario. Los anticuerpos secundarios están vinculados con enzimas fácilmente analizadas. Por lo tanto, una unión puede hacer una señal fuerte debido a más de una interacción. Por lo tanto, el ELISA indirecto es más sensible que el ELISA directo. Sin embargo, el ELISA indirecto puede hacer señales inespecíficas debido a las reacciones cruzadas de los anticuerpos secundarios.
Figura 02: prueba indirecta de ELISA
¿Cuál es la diferencia entre elisa directa e indirecta??
ELISA directo vs indirecto | |
| ELISA directo es menos sensible en comparación con el ELISA indirecto. | Elisa indirecta es más sensible. |
| Tiempo tomado | |
| La prueba directa de ELISA es un proceso rápido. | Elisa indirecta es lento. |
| Uso de anticuerpos | |
| Solo se usan un tipo de anticuerpos (anticuerpos primarios) en ELISA directa. | Los anticuerpos primarios y secundarios se utilizan para ELISA indirecta. |
| Enlace con enzimas | |
| Los anticuerpos primarios están vinculados con enzimas. | Los anticuerpos secundarios están vinculados con enzimas. |
| Reactividad cruzada de los segundos anticuerpos | |
| ELISA directo elimina la reactividad cruzada de los segundos anticuerpos. | ELISA indirecto se ve afectado con reactividad cruzada de los segundos anticuerpos. |
| Señales | |
| Las señales son débiles en comparación con el ELISA indirecto. | Las señales se amplifican en Elisa indirecta. Por lo tanto, es fácil de detectar. |
Resumen -Elisa directa vs indirecta
ELISA es una técnica bioquímica utilizada principalmente en inmunología para detectar la presencia de un anticuerpo o un antígeno en una muestra de sangre de un paciente. Se puede realizar a través de dos procesos conocidos como ELISA directa o indirecta. La prueba directa de ELISA usa solo anticuerpos primarios para detectar el antígeno, mientras que el ELISA indirecto usa anticuerpos primarios y secundarios. En ELISA directo, los anticuerpos primarios se marcan mientras que en los anticuerpos secundarios indirectos de ELISA están marcados. Esta es la diferencia entre Elisa directa e indirecta.
Referencias
1."El ensayo inmunosorbente vinculado a la enzima (ELISA)."Boletín de la Organización Mundial de la Salud. U.S. Biblioteca Nacional de Medicina, 1976. Web. 29 mar. 2017
2. Loon, un. M Van, J. T van der logt, f. W. Heessen y J. Van der Veen. “Ensayo inmunosorbente unido a enzimas que utiliza antígeno marcado para la detección de inmunoglobulina M y An anticuerpos en toxoplasmosis: comparación con inmunofluorescencia indirecta y ensayo inmunosorbente ligado a enzimas de doble sandwich."Journal of Clinical Microbiology. U.S. Biblioteca Nacional de Medicina, junio de 1983. Web. 29 mar. 2017
Imagen de cortesía:
1. "Diagrama Elisa" de Cavitri - Trabajo propio (CC por 3.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Indirecto Elisa" de Cawang - Trabajo propio (CC0) a través de Commons Wikimedia
