Diferencia entre inmunofluorescencia directa e indirecta
El diferencia clave entre inmunofluorescencia directa e indirecta es que el La inmunofluorescencia directa utiliza un anticuerpo único que funciona contra el objetivo de interés, mientras que la inmunofluorescencia indirecta utiliza dos anticuerpos para etiquetar el objetivo de interés.
La inmunofluorescencia o la imagen celular es una técnica que se utiliza para etiquetar un antígeno objetivo específico con un fluoróforo. Aquí, el fluoróforo es un compuesto químico fluorescente que puede volver a emitir la luz sobre la excitación de la luz. Cuando un fluoróforo se une con el antígeno objetivo, permite la detección de la molécula objetivo en la muestra. Para describirlo más, cuando un antígeno se une con un anticuerpo específico, se puede conjugarse con fluoróforos. Por lo tanto, es fácil detectar la presencia del antígeno objetivo en la muestra al observar bajo el microscopio de fluorescencia.
Además, hay dos tipos de inmunofluorescencia; inmunofluorescencia directa e indirecta. La diferencia entre la inmunofluorescencia directa e indirecta radica principalmente en el número de anticuerpos utilizados y la conjugación de fluoróforo. Es decir, en la inmunofluorescencia directa, el fluoróforo se conjuga directamente con el anticuerpo primario, mientras que en la inmunofluorescencia indirecta, el fluoróforo conjugado con el anticuerpo secundario.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la inmunofluorescencia directa?
3. ¿Qué es la inmunofluorescencia indirecta?
4. Similitudes entre inmunofluorescencia directa e indirecta
5. Comparación lado a lado: inmunofluorescencia directa vs indirecta en forma tabular
6. Resumen
¿Qué es la inmunofluorescencia directa??
La inmunofluorescencia utiliza anticuerpos para detectar antígenos objetivo específicos. La inmunofluorescencia directa es uno de los dos tipos de inmunofluorescencia. En la inmunofluorescencia directa, un solo anticuerpo (anticuerpo primario) involucra y el fluoróforo se conjuga directamente con el anticuerpo primario. Al unir el anticuerpo con el antígeno objetivo, el fluoróforo emite fluorescencia que puede detectarse mediante un microscopio de fluorescencia.
Figura 01: inmunofluorescencia directa
Sin embargo, la inmunofluorescencia directa es un método costoso ya que los anticuerpos conjugados primarios son costosos en comparación con los anticuerpos secundarios. Sin embargo, no implica un paso adicional, por lo tanto, una técnica más corta. Además, las uniones no específicas se reducen en la inmunofluorescencia directa. Por lo tanto, la reactividad cruzada de especies es baja. Pero en la detección, la sensibilidad de la inmunofluorescencia directa es débil en comparación con la inmunofluorescencia indirecta .
¿Qué es la inmunofluorescencia indirecta??
La inmunofluorescencia indirecta es el segundo tipo de inmunofluorescencia que involucra dos tipos de anticuerpos, como los anticuerpos primarios y secundarios en el marcado del antígeno objetivo. En este método, el fluoróforo se conjuga con el anticuerpo secundario. Por lo tanto, esta técnica implica un paso adicional.
Figura 02: inmunofluorescencia
Sin embargo, la sensibilidad es alta en este método ya que varios fluoróforos pueden conjugarse con anticuerpos secundarios y facilita la detección. Además, la inmunofluorescencia indirecta es menos costosa debido al hecho de que la conjugación de anticuerpos secundarios es menos costoso y más fácil. En comparación con la inmunofluorescencia directa, la reactividad cruzada de especies es alta en el método indirecto.
¿Cuáles son las similitudes entre la inmunofluorescencia directa e indirecta??
- Son dos tipos de técnica de inmunofluorescencia.
- Los anticuerpos primarios y el fluoróforo implican en ambos métodos.
- Además, la reacción de antígeno-anticuerpo ocurre en ambos métodos.
- Además, la inmunofluorescencia directa e indirecta utiliza un microscopio de fluorescencia para la detección de antígeno.
¿Cuál es la diferencia entre inmunofluorescencia directa e indirecta??
La inmunofluorescencia puede ser directa o indirecta en función de la conjugación de fluoróforo con los anticuerpos utilizados. En inmunofluorescencia directa, el fluoróforo se conjuga con el anticuerpo primario, que es el anticuerpo único que involucra en esta técnica. En contraste con eso, en la inmunofluorescencia indirecta, el fluoróforo se conjuga con el anticuerpo secundario, que es uno de los dos tipos de anticuerpos que involucra en la técnica. Por lo tanto, la principal diferencia entre la inmunofluorescencia directa e indirecta es el tipo de anticuerpo que se conjuga con el fluoróforo.
La siguiente infografía proporciona una comparación lado a lado de la diferencia entre inmunofluorescencia directa e indirecta.
Resumen: inmunofluorescencia directa vs indirecta
La inmunofluorescencia es una técnica que se utiliza para detectar la presencia de antígenos específicos en una muestra. Esta técnica utiliza anticuerpos específicos. Por lo tanto, en esto, los anticuerpos conjugan con fluoróforos para detectarlos usando un microscopio fluorescente. Además, hay dos tipos de inmunofluorescencia a saber, inmunofluorescencia directa e indirecta. La inmunofluorescencia directa implica un solo anticuerpo y fluoróforo directamente conjugado con este anticuerpo. La inmunofluorescencia indirecta implica dos anticuerpos; primario y secundario y fluoróforo conjugado con el anticuerpo secundario. Dado que varios anticuerpos secundarios pueden unirse con un anticuerpo primario y varios fluoróforos pueden conjugarse con anticuerpos secundarios, la inmunofluorescencia indirecta es un método más sensible que el método directo. Además, el método indirecto es menos costoso que el método directo. Por lo tanto, esta es la diferencia entre inmunofluorescencia directa e indirecta.
Referencia:
1."Inmunofluorescencia."Wikipedia, Fundación Wikimedia, 19 de agosto. 2018. Disponible aquí
Imagen de cortesía:
1."HSP IF IGA" de Emmanuelm en EN.Wikipedia, (CC por 3.0) a través de Commons Wikimedia
2."Inmunofluorescencia" por Westhayl618 - Trabajo propio, (CC By -SA 4.0) a través de Commons Wikimedia
