Diferencia entre citometría de flujo y FACS

Diferencia de clave: citometría de flujo vs FACS

En el contexto de la teoría celular, las células son la unidad estructural y funcional básica de todos los organismos vivos. La clasificación celular es una metodología que se utiliza para separar diferentes células de acuerdo con las características fisiológicas y morfológicas. Pueden ser de características intracelulares o extracelulares. La interacción del ADN, el ARN y las proteínas se consideran propiedades interactivas intracelulares, mientras que la forma, el tamaño y las diferentes proteínas superficiales se consideran propiedades extracelulares. En la ciencia moderna, las metodologías de clasificación celular han llevado a ayudar a las diferentes investigaciones en estudios biológicos y también en el establecimiento de nuevos principios a través de la investigación sobre medicina. La clasificación celular se realiza en diversas metodologías que incluyen tanto primitivos con menos equipo y metodologías tecnológicas avanzadas con el uso de maquinaria sofisticada. Citometría de flujo, clasificación de células activadas fluorescentes (FACS), la selección de células magnéticas y la clasificación de una sola célula son las principales metodologías utilizadas. La citometría de flujo y los FAC se desarrollan para diferenciar las células de acuerdo con sus propiedades ópticas. FACS es un tipo especializado de citometría de flujo. La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células de acuerdo con diferentes moléculas, tamaño y volumen de la superficie celular que permite la investigación de células individuales. FACS es un proceso por el cual una mezcla de muestra de células se clasifica de acuerdo con sus características de dispersión de luz y fluorescencia en dos o más contenedores. Este es el diferencia clave entre citometría de flujo y FACS.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la citometría de flujo?
3. Que es FACS
4. Similitudes entre citometría de flujo y FACS
5. Comparación de lado a lado: citometría de flujo vs FACS en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es la citometría de flujo??

La citometría de flujo es un método que se utiliza para examinar y determinar la expresión de moléculas intracelulares y la superficie celular y para definir y caracterizar distintos tipos de células. También se usa para determinar el volumen celular y el tamaño de la célula y evaluar la pureza de las subpoblaciones que están aisladas. Esto permite la evaluación multiparamétrica de células individuales aproximadamente al mismo tiempo. La citometría de flujo se usa para medir la intensidad de la fluorescencia que se produce debido a anticuerpos marcados con fluorescencia que ayudan a identificar proteínas o ligandos que se unen a las células asociadas.

Figura 01: Citometría de flujo

En general, la citometría de flujo incluye tres subystems principalmente. Son los fluidos, la electrónica y la óptica. En la citometría de flujo, hay cinco componentes principales disponibles que se utilizan en la clasificación de células. Son una celda de flujo (una corriente de líquido que se usa para transportarlos y alinear las células para el proceso de detección óptica), un sistema de medición (puede ser de diferentes sistemas que incluyen lámparas de mercurio y xenón, refrigerada por agua de alta potencia o láseres o láseres de diodo refrigerados por aire de baja potencia), un ADC; Sistema de convertidor analógico a digital, sistema de amplificación y una computadora para el análisis. La adquisición es el proceso por el cual los datos se recopilan de las muestras utilizando el citómetro de flujo. Este proceso está mediado por una computadora que está conectada con el citómetro de flujo. El software presente en la computadora analiza la información alimentada a la computadora desde el citómetro de flujo. El software también tiene la capacidad de ajustar los parámetros del experimento que controla el citómetro de flujo.

Que es FACS?

En el contexto de la citometría de flujo, Clasificación celular activada por fluorescencia (FACS) es un método que se utiliza para diferenciar y clasificar una muestra de una mezcla de células biológicas. Las células están separadas de dos o más contenedores. El método de clasificación se basa en las características físicas de la celda que incluye la dispersión de la luz y las características de fluorescencia de la célula. Esta es una técnica científica importante, que se puede utilizar para obtener resultados cuantitativos y cualitativos confiables de las señales de fluorescencia que se emiten de cada célula. Durante los FAC, inicialmente, la mezcla de células preestablecida; Se dirige una suspensión al centro de una corriente estrecha de líquido que fluye rápidamente. El flujo de líquido está diseñado para separar las celdas en la suspensión en función del diámetro de cada celda. Se aplica un mecanismo de vibración a la corriente de suspensión que da como resultado la formación de gotas individuales.

Figura 02: FACS

El sistema está calibrado para crear una sola gota con una celda. Justo antes de la formación de gotas, la suspensión de flujo se mueve a lo largo de un aparato de medición de fluorescencia que detecta la característica de fluorescencia de cada célula. En el punto de formación de gotas, se coloca un anillo de carga eléctrico que se induce una carga al anillo antes de la medición de la intensidad de la fluorescencia. Una vez que las gotas se forman a partir de la corriente de suspensión, una carga está atrapada dentro de las gotas que luego entra en un sistema de deflexión electrostática. Según el cargo, el sistema desvía las gotas en diferentes contenedores. El método de aplicación de la carga varía según los diferentes sistemas utilizados en FACS. El equipo utilizado en FACS se conoce como un clasificador de células activadas por fluorescencia.

¿Cuál es la similitud entre la citometría de flujo y los FACS??

• La citometría de flujo y los FAC se desarrollan para diferenciar las células de acuerdo con sus propiedades ópticas.

¿Cuál es la diferencia entre citometría de flujo y FACS??

Resumen -Flujo Citometría vs FACS

La célula es la unidad estructural y funcional básica de todos los organismos vivos. La clasificación celular es el proceso por el cual las células se aislan y se diferencian en diferentes categorías basadas en sus propiedades intracelulares y extracelulares. La citometría de flujo y los FAC son dos metodologías importantes en la clasificación celular. Ambos procesos se desarrollan para diferenciar las células de acuerdo con sus propiedades ópticas. La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células de acuerdo con diferentes moléculas, tamaño y volumen de la superficie celular que permite la investigación de células individuales. FACS es un proceso por el cual una mezcla de muestra de células se clasifica de acuerdo con sus características de dispersión de luz y fluorescencia en dos o más contenedores. Esta es la diferencia entre citometría de flujo y FACS.

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Referencia:

1. Citometría de flujo (FCM) /FACS | Clasificación celular activada por fluorescencia (FACS). Consultado el 22 de septiembre. 2017. Disponible aquí
2. Ibrahim, Sherrif F., y Ger van den Engh. "Citometría de flujo y clasificación de células."Springerlink, Springer, Berlín, Heidelberg, 1 de enero. 1970 ... accedido el 22 de septiembre. 2017. Disponible aquí

Imagen de cortesía:

1. 'Cytometer'by Kierano - Trabajo propio, (CC por 3.0) a través de Commons Wikimedia
2. 'Clasificación de células asistidas por fluorescencia (FACS) B'By Sarisabban - Sabban, Sari (2011) Desarrollo de un sistema modelo in vitro para estudiar la interacción de Equus caballus IGE con su receptor FCεRI de alta afinidad (Tesis de PHD), la Universidad de Sheffield , (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia