Diferencia entre GFP y EGFP

El diferencia clave entre GFP y EGFP es que el GFP es Una proteína de tipo salvaje incorporada en la clonación molecular de las células no mamíferas, mientras que el EGFP es un tipo de GFP mejorado o diseñado que se puede usar en las células de mamíferos.

La clonación molecular es una técnica avanzada que los científicos usan inmensamente para expresar proteínas a través de la tecnología recombinante. En la tecnología de ADN recombinante, es necesario transformar con éxito el vector recombinante al organismo anfitrión.  Por lo tanto, durante el proceso de transformación, debe identificarse y confirmarse si el gen de interés se ha transformado o no al huésped. Para evaluar esto, los biólogos moleculares adoptan varias técnicas. De esas técnicas, uno es el gen reportero. Estos genes reporteros actúan como marcadores seleccionables para seleccionar los transformantes correctos. Por lo tanto, la proteína fluorescente verde (GFP) y la proteína fluorescente verde mejorada (EGFP) son dos proteínas informadoras utilizadas en la clonación molecular.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es GFP?
3. ¿Qué es EGFP?
4. Similitudes entre GFP y EGFP
5. Comparación de lado a lado: GFP vs EGFP en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es GFP??

GFP es una proteína de tipo salvaje que contiene 238 residuos de aminoácidos y varias regiones seleccionables de secuencias de aminoácidos que lo distinguen de las otras proteínas fluorescentes. Además, esta proteína de tipo salvaje estaba originalmente aislada de Aequorea Victoria; un tipo de medusa. Sin embargo, en fenómenos naturales, la medusa pudo producir fluorescencia de color verde en respuesta a ciertos estímulos.

Anteriormente, este concepto sorprendió a los científicos, y decidieron usarlo en sus tecnologías de ADN recombinantes. En consecuencia, los científicos utilizaron esta forma mutante del gen de tipo salvaje como gen reportero en sus estudios de expresión génica. El gen de tipo salvaje de GFP es capaz de producir una proteína que proporciona fluorescencia a temperatura ambiente o bajo luz UV. Por lo tanto, cuando se inserta en los transformantes, expresa y produce fluorescencia. Si la fluorescencia se produce después del proceso de transformación, confirma el éxito del proceso de transformación. En palabras simples, la emisión de fluorescencia señala la transformación exitosa del vector que lleva el gen de interés al huésped.

Figura 01: GFP

Por esta razón, el GFP actúa como un en vivo marcador de expresión génica. En la actualidad, las técnicas de ingeniería genética están en uso para producir GFP. Además, están disponibles muchas versiones mejoradas de GFP, como EGFP. Por lo tanto, esto permite el uso eficiente del GFP en la clonación molecular y los estudios de expresión génica.

¿Qué es EGFP??

La proteína fluorescente verde mejorada o EGFP es una versión mejorada de GFP. En palabras simples, podemos definir EGFP como una versión de ingeniería de GFP de tipo salvaje. Cuando el gen de tipo salvaje de GFP muta, produce efectos beneficiosos. Por lo tanto, el gen mutado de GFP permite la expresión de nuevos caracteres, y como resultado de eso, podemos producir GFP mejorado con características mejoradas. Además, podemos introducir mutaciones con éxito en el gen GFP de tipo salvaje usando irradiación o métodos químicos. Estos genes mutados luego producen el EGFP, que tiene características más beneficiosas.

Figura 02: EGFP

Las características mejoradas de EGFP son las siguientes;

• Capaz de emitir señales de fluorescencia más fuertes.
• Tiene alta sensibilidad.
• Puede usarlo en células de mamíferos en lugar de procariotas y otros eucariotas de nivel inferior.
• Además, proporciona una mayor pureza del producto.

Por lo tanto, en comparación con GFP, EGFP es la opción preferida para los estudios de expresión génica. Sin embargo, el producto es más caro en comparación con GFP.

¿Cuáles son las similitudes entre GFP y EGFP??

• GFP y EGFP son dos proteínas que tienen la capacidad de emitir color verde
• Por lo tanto, ambas funcionan como proteínas reporteras en los estudios de expresión génica.
• Además, es posible sintetizar ambos utilizando tecnología de ADN recombinante.
• Además, es fácil mutar estos dos tipos para sintetizar formas mejoradas.

¿Cuál es la diferencia entre GFP y EGFP??

El gen reportero es un gen que se adhiere al gen de interés en la tecnología de ADN recombinante. Se indica la transformación exitosa del vector recombinante al huésped. Aquí, GFP y EGFP son dos tipos de proteínas fluorescentes verdes que funcionan como proteínas informadoras. Sin embargo, la diferencia clave entre GFP y EGFP es que el GFP es un tipo salvaje, mientras que EGFP es una versión diseñada de GFP. Además, EGFP tiene características más beneficiosas que GFP. Por ejemplo, EGFP produce una luz fluorescente más fuerte y es más sensible que el GFP. Otra diferencia entre GFP y EGFP son los sistemas en los que podemos usar estos. Los sistemas no mamíferos usan GFP, mientras que los sistemas de mamíferos usan EGFP.

La siguiente infografía presenta la diferencia entre GFP y EGFP en forma tabular.

Resumen -GFP vs EGFP

GFP y EGFP son proteínas informadoras en la clonación molecular y los estudios de expresión génica. GFP es la proteína de tipo salvaje, que es una proteína fluorescente verde. La proteína estaba inicialmente de forma aislada de las medusas Aequorea Victoria. En contraste, EFGP es una forma mejorada de proteína GFP. Es un mutante del tipo salvaje con características mejoradas. Por lo tanto, EFGP tiene la mayor resistencia a la señal y una mayor sensibilidad. Por lo tanto, podemos usarlo en vectores de mamíferos. En contraste, el uso de GFP es principalmente solo en vectores no mamíferos. En general, esta es la diferencia entre GFP y EGFP.

Referencia:

1.Cinelli, R A, et al. “La proteína fluorescente verde mejorada como herramienta para el análisis de la dinámica y la localización de proteínas: estudio de fluorescencia local a nivel de una sola molécula.Photochemistry and Photobiology., U.S. Biblioteca Nacional de Medicina, junio de 2000. Disponible aquí  
2."PDB101: Molécula del mes: proteína fluorescente verde (GFP)."RCSB: PDB-101. Disponible aquí

Imagen de cortesía:

1."Película de proteínas fluorescentes GFP" por Erin Rod - Trabajo propio, (CC BY -SA 4.0) a través de Commons Wikimedia 
2."Ca2 amigo2 egfp ratón" por Dudek, Serena; Curuana, Douglas; Carstens, Kelly - Trabajo propio, (CC BY -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia