Diferencia entre la tinción de gram y el ácido rápido

Diferencia clave: Gram Stain vs ácido rápido
 

Las bacterias son microorganismos muy pequeños. Son transparentes y su detección es difícil en condiciones vivas y sin manchas. Por lo tanto, se desarrollan varios métodos de tinción para facilitar la detección bacteriana. Hay tres tipos principales de técnicas de tinción: tinción simple, tinción diferencial y tinción estructural. La tinción diferencial es una técnica que utiliza más de una mancha para diferenciar las bacterias. La tinción de gram y las manchas ácidas rápidas se conocen popularmente como manchas diferenciales. La tinción de Gram es una técnica de tinción diferencial, que separa las bacterias en dos grupos conocidos como bacterias Gram-positivas y bacterias gramnegativas. La mancha ácida-rápida es una mancha diferencial utilizada para identificar organismos ácido-rápido como Mycobacterium de organismos rápidos no ácidos. Esta es la diferencia clave entre la tinción de gram y la mancha rápida ácida.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la mancha de gram? 
3. Que es el ácido rápido
4. Similitudes entre la mancha de gram y el ácido rápido
5. Comparación de lado a lado: mancha de gram vs ácido rápido en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es la mancha de gram??

Gram Stain es una importante técnica de tinción diferencial utilizada para la identificación bacteriana en microbiología. Esta técnica fue introducida por el bacteriólogo danés Hans Christian Gram en 1884. La tinción de Gram clasifica las bacterias en dos grupos principales llamados Gram Positive y Gram Negative, que son muy importantes en la clasificación e identificación bacteriana. Los microbiólogos realizan tinción de gram como un paso inicial en la caracterización bacteriana durante sus estudios.

Las bacterias se agrupan en función de las diferencias en su pared celular. Las bacterias Gram positivas se componen de una capa de peptidoglucano grueso en su pared celular, mientras que las bacterias gram negativas se componen de una delgada capa de peptidoglucano en su pared celular. El resultado de la tinción de gram se basará en la diferencia en el grosor de la capa de peptidoglucano de la pared celular.

La tinción de Grams se realiza utilizando cuatro reactivos diferentes, a saber; Tinción primaria, agente mordante y decolorante y contrarrestar manchas. La violeta de cristal y la safranina se usan como manchas primarias y de mostrador, respectivamente, mientras que los gramos de yodo y 95% de alcohol se usan como mordantes y decoloradores, respectivamente. Los pasos básicos de la mancha de Grams son los siguientes;

1. Se prepara una mancha bacteriana en un tobogán de vidrio limpio, se fija el fuego y se enfría.
2. El frotis está inundado de cristal violeta durante 1 a 2 minutos.
3. El frotis se enjuague con agua del grifo de carrera lenta para eliminar el exceso de manchas.
4. Grams yodine se aplica al frotis durante 1 minuto.
5. El frotis está enjuagado con agua del grifo de carrera lenta
6. El frotis se lava con alcohol al 95% durante 2 a 5 segundos y se enjuague con agua del grifo lento.
7. El frotis está manchado con safranina durante 1 minuto
8. El frotis se enjuague con agua del grifo lento, se seca y se observa bajo el microscopio.

Al final de la tinción de gram, se observarán bacterias gram negativas en color rosa, mientras que las bacterias positivas de gramos se observarán en color púrpura.

Figura 01: bacterias gram negativas y gram positivas

El resultado de la mancha de Grams se decide por el grosor de la capa de peptidoglucano en su pared celular. Durante el paso de decoloración, la tinción primaria y la mordante se eliminan fácilmente de las bacterias gram negativas y se vuelven incoloros ya que tienen una delgada capa de peptidoglicano. La mancha primaria se retiene en las bacterias Gram Position ya que tienen una capa gruesa de peptidoglucano. La contradictoria no será efectiva para las bacterias Gram Position debido a la retención de la mancha primaria. Por lo tanto, las bacterias positivas de Grams serán visibles en el color de la mancha primaria, es decir, color púrpura. La mancha de mostrador manchará las bacterias gram negativas, y serán visibles en color de selección, que es el color safranina. Por lo tanto, es fácil clasificar las bacterias en dos grupos por tinción de gram y es valioso en la diferenciación e identificación bacteriana.

Que es el ácido rápido?

La rápida ácido es una propiedad física de ciertas bacterias, específicamente su resistencia a la decoloración por los ácidos durante los procedimientos de tinción. Una vez manchados, estos organismos resisten el ácido diluido y / o los procedimientos de decoloración basados ​​en etanol comunes en muchos protocolos de tinción. Por lo tanto, el nombre 'ácido rápido' se da a esos organismos. Esta propiedad se muestra debido a un alto nivel de material ceroso (ácidos micólicos) en sus paredes celulares. Esta prueba es crítica para la identificación de Tuberculosis micobacteriana.

Figura 2: micobacterias ácidas rápidas

Esta mancha rápida ácida fue desarrollada por Paul Ehrlich en 1882. La técnica rápida ácida de Ehrlich fue modificada por Ziehl-Neelsen y ahora se usa con más frecuencia. El procedimiento de tinción rápida ácida implica tres reactivos diferentes. Carbol Fuschin se usa como la mancha principal. El alcohol ácido se usa como agente decolorante. El azul de metileno se usa como mancha de mostrador. El procedimiento de tinción se realiza de la siguiente manera.

1. La mancha primaria (Carbol Fucsin) se aplica a la muestra fija en el portaobjetos (todas las celdas se tiñen en color rojo).
2. El portaobjetos se calienta al vapor durante 5 minutos, lo que conduce las manchas a las células correctamente.
3. Luego se agrega la solución de decolorización (esto elimina el tinte rojo de todas las células, excepto las bacterias ácidas rápidas).
4. El azul de metileno se agrega como un contador (colorea todas las células bacterianas decoloradas).
5. Las bacterias ácidas rápidas permanecen rojas, mientras que las bacterias rápidas no ácidas se manchan en azul.

¿Cuáles son las similitudes entre la tinción de gram y el ácido rápido??

• La tinción de gram y el ácido rápido son dos técnicas de tinción diferencial.
• Ambas técnicas clasifican las bacterias en dos grupos.
• Ambas técnicas usan dos manchas y una degradación.

¿Cuál es la diferencia entre la mancha de gram y el ácido rápido??

Resumen -Gram Stain vs ácido rápido

La visualización de microorganismos en el estado vivo es difícil. Por lo tanto, las manchas biológicas y los procedimientos de tinción se utilizan ampliamente para estudiar sus propiedades. La tinción diferencial es un tipo de técnica de tinción utilizada para diferenciar las bacterias. La mancha de gram y la tinción rápida de ácido son dos técnicas de tinción diferencial. La tinción de Gram diferencia bacterias gram negativas y bacterias Gram positivas en función del grosor de sus paredes celulares. La tinción ácida rápida diferencia las bacterias ácidas rápidas de bacterias rápidas no ácidas basadas en el contenido de ácido micólico en la pared celular. Esta es la diferencia entre ácido rápido y mancha de gram.

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Referencias:

1. Aryal, Sagar. “Principio de manchas ácido, procedimiento, interpretación y ejemplos."Notas de microbiología en línea. norte.pag., 08 de mayo de 2017. Web. Disponible aquí. 20 de julio de 2017.
2. Manchas diferenciales para identificar bacterias: gramo, ácido rápido y endospore. norte.pag., norte.d. Web. Disponible aquí. 20 de julio de 2017.

Imagen de cortesía:

1. "Nodo linfático- Infección micobacteriana atípica (MAI)- Tinga de AFB" por Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) a través de Flickr
2. "Gram Stain 01" de Y Tambe - Y Tambe's File (CC BY -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia