Diferencia entre inmunofluorescencia e inmunohistoquímica

Diferencia clave: inmunofluorescencia vs inmunohistoquímica
 

Diagnóstico de enfermedades, que utiliza métodos biológicos moleculares, se ha convertido en un área emergente de la tecnología de laboratorio clínico. Incluye todas las pruebas y métodos para identificar una enfermedad y comprender la causa de una enfermedad analizando el ADN, el ARN o las proteínas expresadas en un organismo. Los rápidos avances en diagnósticos moleculares han permitido investigaciones básicas sobre enfermedades transmisibles y no comunicables. Estos se utilizan para determinar los cambios en la secuencia o los niveles de expresión en genes cruciales o proteínas involucradas en la enfermedad. La inmunofluorescencia (IF) y la inmunohistoquímica (IHC) son dos técnicas de tales utilizadas en biología del cáncer. Si es un tipo de IHC donde se usa un método de detección de fluorescencia para analizar anticuerpos monoclonales y policlonales, mientras que IHC utiliza métodos basados ​​en productos químicos para detectar los anticuerpos monoclonales y policlonales. Esta es la diferencia clave entre si e ihc.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la inmunofluorescencia? 
3. ¿Qué es la inmunohistoquímica?
4. Similitudes entre inmunofluorescencia e inmunohistoquímica
5. Comparación lado a lado: inmunofluorescencia vs inmunohistoquímica en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es la inmunofluorescencia (IF)??

La inmunofluorescencia es una técnica de detección en la que los anticuerpos utilizados en el ensayo se marcan con colorantes fluorescentes o proteínas fluorescentes para el propósito de detección. Los anticuerpos secundarios marcados pueden dar lugar a señales de fondo no deseadas; Por lo tanto, si la técnica se basa en el etiquetado del anticuerpo primario en sí mismo en la actualidad para evitar señales no deseadas durante la detección. A través de esta técnica, se evita la unión no específica entre el anticuerpo primario y secundario, y es más rápido ya que no hay un paso de incubación secundario involucrado. La calidad de los datos también se mejora.

Figura 01: Tinción de inmunofluorescencia doble para Brdu, Neun y GFAP

Los fluorocromos o los tintes fluorescentes son compuestos que pueden absorber la radiación, preferiblemente radiación ultra violeta que está excitada. Cuando las partículas llegan al estado fundamental desde el estado excitado, emiten radiación que es capturada y detectada por un detector para formar un espectro. Es de gran importancia que la etiqueta fluorescente sea compatible y estable para la reacción particular y debe conjugarse adecuadamente con el anticuerpo para obtener resultados precisos. Uno de los fluorocromos más utilizados es el isotiocianato de fluoresceína (FITC), que es de color verde, con longitudes de onda máxima de absorción y emisión de 490 nm y 520 nm, respectivamente. Rhodamine, otro agente utilizado en if, es de color rojo y tiene distintas longitudes de onda de absorción y emisión de 553 nm y 627 nm.

¿Qué es la inmunohistoquímica (IHC)??

IHC es un método de prueba molecular practicado para identificar y confirmar la presencia del antígeno en la célula objetivo. La célula objetivo podría ser una partícula infecciosa, un patógeno microbiano o una célula tumoral maligna. IHC utiliza anticuerpos monoclonales y policlonales para determinar la presencia de antígenos presentes en la superficie celular de las células objetivo. La técnica se basa en la unión de antígeno-anticuerpo. Un marcador de detección se conjuga con estos anticuerpos para detectar la presencia o la ausencia del antígeno particular. Estos marcadores pueden ser marcadores químicos como enzimas, anticuerpos etiquetados con fluorescencia o anticuerpos marcados con radio.

Figura 02: rebanada de ratón cerebro manchado por inmunohistoquímica

La aplicación más popular de IHC es la biología de las células cancerosas para identificar la presencia de tumores malignos, pero también se usa para la detección de enfermedades infecciosas.

¿Cuáles son las similitudes entre la inmunofluorescencia y la inmunohistoquímica??

• La inmunofluorescencia y la inmunohistoquímica tienen lugar en condiciones in vitro.
• Ambas técnicas se basan en el antígeno-anticuerpo
• Ambas son técnicas muy rápidas.
• Los resultados de las técnicas son reproducibles.
• Ambos han mejorado la calidad de los datos.
• Estas técnicas utilizadas en diagnósticos para cáncer y enfermedades infecciosas.

¿Cuál es la diferencia entre inmunofluorescencia e inmunohistoquímica??

Resumen -Inmunofluorescencia vs inmunohistoquímica

Los mecanismos moleculares han provocado muchos cambios en el campo de la medicina, dando lugar a métodos avanzados de prueba molecular que han provocado revoluciones en el campo del diagnóstico. Estos inventos han llevado a una identificación y confirmación rápidas y precisas de la enfermedad, lo que permite la administración exitosa y la producción de medicamentos. Estas técnicas también se utilizan en farmacología para encontrar los objetivos de los medicamentos y confirmar las propiedades farmacocinéticas del fármaco durante el metabolismo del fármaco.  Si e IHC son dos métodos de diagnóstico que se basan en el concepto de unión a antígeno y anticuerpos, aunque el modo de detección en ambas técnicas difiere. Si utiliza el principio de fluorescencia para detectar el antígeno e IHC utiliza el concepto de conjugación química para detectar el antígeno. Esta es la diferencia entre si e ihc.

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Referencias:

1. Aoki, Valéria, et al. "Inmunofluorescencia directa e indirecta."Anais Brasileiros de Dermatologia, Sociedadebrasileira de Dermatologia, disponible aquí. Consultado el 25 de agosto. 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Aplicaciones de inmunohistoquímica."Journal of Pharmacy & BioAllied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, Aug. 2012, disponible aquí. Consultado el 25 de agosto. 2017.

Imagen de cortesía:

1. "Tinción de inmunofluorescencia doble para Brdu, Neun y GFAP" por Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, Fan X, Xu G, Frey Wh 2nd, Liu X. - La entrega intranasal del factor de crecimiento transformador-BETA1 en ratones después de la carrera reduce el volumen del infarto y aumenta la neurogénesis en la zona subventricular; PMID 19077183 (CC por 2.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Hipotálamo de un tejido de ratón manchado por ABC-Inmunohistoquímica" por Zabbn-Trabajo propio (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia