Diferencia entre la hibridación in situ y la inmunohistoquímica

Diferencia clave: hibridación in situ vs inmunohistoquímica
 

El diagnóstico de cáncer y enfermedades infecciosas es una tendencia popular en la que se utilizan nuevas técnicas basadas en proteómica y genómica con el fin de identificar tumores o células infecciosas, su proliferación y los sitios de desarrollo celular y analizar la base genética de las enfermedades más comunicables y no comunicables. Esto dará como resultado un procesamiento y diseño preciso de medicamentos y en el desarrollo de terapias personalizadas para enfermedades. La hibridación in situ (ISH) y la inmunohistoquímica (IHC) son dos técnicas de tales utilizadas en biología del cáncer y la diferencia clave entre la hibridación in situ y la inmunoquímica radica en las moléculas que se utilizan en el procedimiento de análisis. En ISH, las sondas de ácido nucleico se usan en el análisis, mientras que, en IHC, se utilizan anticuerpos monoclonales y policlonales para las determinaciones diagnósticas.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la hibridación in situ?
3. ¿Qué es la inmunohistoquímica?
4. Similitudes entre hibridación in situ e inmunohistoquímica
5. Comparación de lado a lado: hibridación in situ versus inmunohistoquímica en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es la hibridación in situ (ish)??

La hibridación in situ es una técnica de hibridación de ácido nucleico que se realiza directamente en una porción o sección de tejido, en todo el tejido o en las células. La técnica depende de la teoría del emparejamiento de bases complementarias de Watson Crick, lo que resulta en híbridos de ADN de ADN o híbridos de ADN-ARN que pueden detectar genes mutados o identificar el gen de interés requerido. Las secuencias de ADN de una sola varada, las secuencias de ADN de doble cadena varada, las secuencias de ARN de una sola cadena o las secuencias de oligonucleótidos sintéticos se utilizan como sondas durante la técnica de hibridación, y estas sondas se marcan con un fósforo radiactivo en su extremo de 5 'para los procedimientos de identificación de la autorradiografía o marcadas. Existen diferentes tipos de técnicas ISH disponibles en función del tipo de sonda utilizada y el tipo de técnica de visualización seguida.

Figura 01: hibridación fluorescente in situ

Hay muchas aplicaciones de ISH, principalmente en el diagnóstico molecular de enfermedades infecciosas para identificar la presencia de patógenos y confirmar el patógeno a través del diagnóstico molecular. También se utiliza en los campos de la biología del desarrollo, el cariotipado y el análisis filogenético y el mapeo físico de los cromosomas.

¿Qué es la inmunohistoquímica (IHC)??

En la técnica de IHC, la molécula principal analizada es el antígeno. Durante IHC, se utilizan anticuerpos monoclonales y policlonales para determinar la presencia de antígenos tras la infección o el estado de proliferación de células malignas. La técnica se basa en la unión de antígeno-anticuerpo, y las etiquetas enzimáticas se utilizan para esta técnica; Una de esas aplicaciones es el ELISA (ensayo inmunosorbente vinculado en la enzima). Los marcadores también pueden ser anticuerpos etiquetados con fluorescentes o anticuerpos marcados con radio.

Figura 02: inmunohistoquímica

IHC se usa ampliamente para la detección de células cancerosas. Los procedimientos de diagnóstico se dirigen a los antígenos presentes en las células tumorales para identificar y caracterizar el tumor. El mismo procedimiento se incorpora para diagnosticar agentes infecciosos. Los anticuerpos monoclonales y policlonales también se utilizan para analizar diferentes productos genéticos al permitir la reacción de unión al anticuerpo-antígeno entre la proteína deseada y el anticuerpo sintético administrado.

¿Cuáles son las similitudes entre la hibridación in situ y la inmunohistoquímica??

• Ish e IHC son reacciones altamente específicas.
• Ambas técnicas son altamente precisas.
• Ambas técnicas se pueden usar en diagnóstico para el cáncer y las enfermedades infecciosas.
• Estas técnicas se realizan en entornos estériles in vitro.
• Ambas son técnicas rápidas que proporcionan resultados reproducibles.
• ISH e IHC utilizan métodos de detección como el etiquetado de radio y las técnicas de fluorescencia.

¿Cuál es la diferencia entre la hibridación in situ y la inmunohistoquímica??

Resumen: hibridación in situ vs inmunohistoquímica

Los diagnósticos moleculares son métodos rápidos y confirmatorios que se pueden utilizar para identificar una enfermedad no transmisible, como el cáncer o la enfermedad transmisible, como el VIH o la tuberculosis basada en los marcadores moleculares presentes en las células que conducen a la manifestación de la enfermedad. Los marcadores moleculares pueden estar presentes en forma de proteínas expresadas o en el nivel genético en función de las cuales se introducen diferentes técnicas novedosas para aumentar la eficiencia y son menos laboriosos, aunque existe un alto costo involucrado con estas técnicas. Por lo tanto, ISH depende del ADN-ADN o la formación híbrida de ADN-ARN, e IHC depende de las reacciones específicas entre el anticuerpo y el antígeno. Esta es la diferencia entre la hibridación in situ.

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Referencias:

1. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Aplicaciones de inmunohistoquímica."Journal of Pharmacy & BioAllied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, Aug. 2012, disponible aquí. Consultado el 24 de agosto. 2017.
2. "Hibridación in situ (ish)."Centro Nacional de Información de Biotecnología, u.S. Biblioteca Nacional de Medicina, disponible aquí. Consultado el 24 de agosto. 2017.

Imagen de cortesía:

1. "Fish (hibridación fluorescente in situ)" por Mrmatze - Trabajo propio (CC By -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Inmunohistoquímico2" por Imoen en el inglés Wikipedia (CC By-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia