El diferencia clave Entre la inserción y los vectores de reemplazo es que el vector de inserción tiene la capacidad de insertar longitudes moderadas de ADN extraño, mientras que el vector de reemplazo tiene la capacidad de acomodar mayores longitudes de ADN extraño.
Los vectores de fago son los bacteriófagos utilizados para la clonación. Hay dos tipos de vectores de fago; son vector de inserción y vector de reemplazo. Además, todos los vectores de fago consisten en genes no esenciales. Sin embargo, estos genes deben eliminarse de los fagos para facilitar nuevas inserciones de ADN extranjeras.
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué son los vectores de inserción?
3. ¿Qué son los vectores de reemplazo?
4. Similitudes entre la inserción y los vectores de reemplazo
5. Comparación lado a lado: inserción vs vectores de reemplazo en forma tabular
6. Resumen
En primer lugar, el vector de inserción es la forma más simple de vectores de clonación lambda. De hecho, es un tipo de vector de fago que tiene un sitio de restricción único introducido dentro del genoma del vector en la posición de ADN opcional. Además, el ADN del fago permanece sin remoción. Esta no retirada del ADN del fago reduce el tamaño de los insertos (ADN extraño) que se clonará dentro del vector. Además, estos vectores son útiles en la clonación y expresión de ADNc. GT10, GT11 y ZAP son ejemplos de este vector.
Figura 01: Lambda Phage
El vector de inserción consta de un solo sitio de reconocimiento. La función principal de este vector es desarrollar bibliotecas de ADNc derivadas de secuencias de ARNm eucariotas. Además, solo puede acomodar longitudes de ADN extranjero que varían entre 05 y 11 kb. Además, posee un sitio de escisión único para la inserción del ADN extranjero.
Vector de reemplazo o vector de sustitución es un tipo de vector de fago desarrollado a partir de la eliminación de una región media de 'fragmento de relleno' del ADN de fago. El inserto de ADN extraño deseado reemplaza el ADN del fago.
Figura 02: Vector de reemplazo
Los vectores de reemplazo son importantes para crear bibliotecas genómicas como EMBL4 y Charon40. Estos vectores pueden acomodar una mayor longitud de ADN extraño que varía entre 08-24 kb de longitudes. La región de relleno también consiste en un gen que hace que el vector de fago no sea viable dentro de un huésped bacteriano.
Inserción vs vectores de reemplazo | |
El vector de inserción es un tipo de vector de fago que tiene un sitio de restricción introducido dentro del genoma de fago en el sitio de ADN opcional. | El vector de reemplazo es un tipo de vector de fago desarrollado a partir de la eliminación de una región media de 'fragmento de relleno' de ADN de fago |
Tamaño de fragmentos de inserción | |
05-11 kb longitud | 08-24 kb longitud |
Fragmento de relleno | |
Sin fragmento de relleno | El fragmento de relleno se reemplaza por un inserto extranjero |
Función | |
Importante para crear bibliotecas de ADNc | Importante en la creación de bibliotecas del genoma |
Ejemplos | |
GT10, GT11 y ZAP son ejemplos | EMBL4 y Charon40 son ejemplos |
Sitio de escisión | |
Un sitio de escote único está presente | El sitio de escisión contiene genes que no son esenciales para el ciclo lítico |
Tanto los vectores de inserción como de reemplazo son dos tipos de vectores de fago. Ambos vectores tienen sitios de restricción que facilitan el alojamiento de nuevos insertos de ADN extranjeros. Los vectores de inserción son importantes para crear bibliotecas de ADNc, mientras que los vectores de reemplazo son importantes para crear bibliotecas genómicas. Además, los vectores de inserción acomodan insertos de ADN con una longitud moderada. Pero los vectores de reemplazo pueden acomodar longitudes más altas de insertos de ADN extraños. En general, esta es la diferencia clave entre la inserción y los vectores de reemplazo.
1. Hasty, P, et al. “La eficiencia de la inserción versus la orientación del vector de reemplazo varía en diferentes loci cromosómicos."Biología molecular y celular, u.S. Biblioteca Nacional de Medicina, DEC. 1994, disponible aquí.
2. "Vectores de inserción Lambda."Biology 335 Notas de conferencia - Vectores Lambda, disponibles aquí.
3. "Vector de reemplazo."Vector de reemplazo - Terminología de biología molecular para el vector de reemplazo - Genscript, disponible aquí.
1. "Lambda Phage" de Lizanne Koch - Trabajo propio con Chembiodraw (dominio público) a través de Commons Wikimedia