Diferencia entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1

El diferencia clave entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1 es que El fragmento de Klenow es una gran porción de la ADN polimerasa 1 que carece de actividad de exonucleasa de 5 'a 3', mientras que la ADN polimerasa es una enzima de mi. coli que tiene los tres dominios, incluida la actividad de exonucleasa de 5 'a 3'.

La ADN polimerasa es una de las enzimas clave involucradas en la replicación del ADN en los organismos vivos. Hay diferentes formas de enzima de ADN polimerasa que se encuentran en eucariotas y procariotas basadas en el tamaño y la forma. La ADN polimerasa 1, 2 y 3 se encuentran solo en organismos procariotas, y juegan diferentes roles en la replicación del ADN. La ADN polimerasa 1 tiene tres dominios con actividad de exonucleasa de 5 'a 3', 3 'a 5' y actividad de exonucleasa de 5 'a 3'. El fragmento de Klenow es un producto proteolítico de la ADN polimerasa 1. Posee actividades de exonucleasa de 5 a 3 'polimerasa y 3' a 5 'de la ADN polimerasa 1 intacta 1, pero carece de la actividad de exonucleasa 5' a 3 '.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es el fragmento de Klenow? 
3. ¿Qué es la ADN polimerasa 1?
4. Similitudes entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1
5. Comparación lado a lado: fragmento de klenow vs ADN polimerasa 1 en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es el fragmento de Klenow??

El fragmento de Klenow es una gran parte de la ADN polimerasa 1. A diferencia de la actividad de exonucleasa de 5 'a 3', no se ve en el fragmento de Klenow, ya que carece del dominio de exonucleasa hacia adelante 5 'a 3'. Los fragmentos de Klenow se producen digeriendo la ADN polimerasa 1 con una proteasa llamada subtilisina, que es una enzima que diga proteínas. En algunas aplicaciones, la actividad de exonucleasa de 3 'a 5' del fragmento de Klenow se vuelve indeseable. Se puede eliminar introduciendo una mutación en el gen que codifica el fragmento de Klenow. La enzima resultante que tiene solo la actividad de la polimerasa 5 'a 3' se conoce como el fragmento de exo-klenow. Morfológicamente, el fragmento de Klenow se asemeja a la mano derecha humana. Tiene dominio de exonucleasa 3'-5 'N-terminal y el dominio de la polimerasa C-terminal separado por aproximadamente 30 A.

Figura 01: Klenow Fragment y ADN polimerasa 1

El fragmento de Klenow es una herramienta importante en las técnicas biológicas moleculares. Los fragmentos de Klenow tienen múltiples usos. Son extremadamente importantes en la clonación de extremo recto para producir fragmentos contundentes. Los fragmentos de Klenow pueden eliminar 3 'los voladizos o llenar los voladizos de 5' para formar extremos contundentes. Además, los fragmentos de Klenow se utilizan para sintetizar ADN de doble cadena de hilos individuales. Además, se utilizan para preparar sondas etiquetadas radiactivamente utilizando la actividad de la ADN polimerasa dependiente de ADN 5'TO 3 '.

¿Qué es la ADN polimerasa 1??

La ADN polimerasa 1 (Pol 1) es una enzima que se encuentra en los procariotas que se necesita para la replicación del ADN bacteriano. Es el primer tipo de ADN polimerasa descubierto por Arthur Kornberg en 1956. Pol 1 es la polimerasa más abundante en mi. coli. Está codificado por el gen pola y compuesto por 928 aminoácidos. Consta de tres dominios. Los tres dominios cumplen distintas funciones. Dos dominios realizan una actividad de exonucleasa de 5 'a 3' y actividad de exonucleasa de 3 'a 5'. Debido a esta actividad poseída por Pol 1, es popular como una enzima reparadora de ADN en lugar de una enzima replicante de ADN. El tercer dominio tiene la capacidad de catalizar múltiples polimerizaciones (5 'a 3') antes de la liberación del ADN de la plantilla y conectando fragmentos de Okazaki juntos llenando nuevos ADN y eliminando los cebadores de ARN.

Figura 02: ADN polimerasa

Pol 1 aislado de E. coli se usó ampliamente en aplicaciones moleculares. Sin embargo, una vez que se descubrió la polimerasa Taq, reemplazó el E. coli Pol 1 en tecnología de PCR. Taq polimerasa es una especie de ADN polimerasa termostable que pertenece a Pol 1.

¿Cuáles son las similitudes entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1?

• El fragmento de Klenow es una gran parte de la ADN polimerasa 1.
• Tienen actividad de la ADN polimerasa de ADN 5'TO 3 'y la actividad de exonucleasa 3'TO 5' que median la revisión de la prueba.
• Se utilizan para múltiples propósitos.

¿Cuál es la diferencia entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1?

La diferencia clave entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1 es que el fragmento de Klenow carece de actividad de exonucleasa de 5 'a 3', mientras que la ADN polimerasa 1 tiene actividad de exonucleasa 5 'a 3'. Por lo tanto, el fragmento de Klenow tiene dos dominios, mientras que la ADN polimerasa 1 tiene los tres dominios.

A continuación, la infografía muestra más detalles de la diferencia entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1.

Resumen -Klenow Fragment vs ADN polimerasa 1

La ADN polimerasa 1 es una enzima de mi. coli que tiene tres dominios como dominio de polimerización 5 'a 3', dominio de exonucleasa de 3 'a 5' y dominio de exonucleasa de 5 'a 3'. El fragmento de Klenow es una gran parte de la ADN polimerasa. Carece de un dominio de la ADN polimerasa 1, que es el dominio de exonucleasa 5 'a 3'. La diferencia clave entre el fragmento de Klenow y la ADN polimerasa 1 es que los fragmentos de Klenow no tienen un dominio de exonucleasa de 5 'a 3', mientras que la ADN polimerasa 1 tiene un dominio de exonucleasa 5 'a 3'.

Referencia:

1. "ADN polimerasa I - una descripción general | Temas de ciencias científicas ". Con ciencias.Com, 2020, disponible aquí.
2. "Fragmento de Klenow". Interno.Wikipedia.Org, 2020, disponible aquí.

Imagen de cortesía:

1. "PolymeraseSedomains" por (desconocida) "Molécula del mes", marzo de 2000 - Protein Data Bank, (dominio público) a través de Commons Wikimedia
2. "ADN polimerasa" von Yikrazuul - Eigenes Werk (CC BY -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia