Diferencia entre PCR y PCR en tiempo real

El Diferencia clave entre PCR y PCR en tiempo real es que la PCR convencional requiere más tiempo que la PCR en tiempo real, ya que utiliza electroforesis en gel para analizar los productos de PCR amplificados.

La reacción en cadena de PCR o polimerasa es un descubrimiento revolucionario en la biología molecular moderna, que fue desarrollada por primera vez por el químico Kary Mullis en 1983. Permite amplificar una secuencia única en un ADN complejo para el análisis.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es PCR?  
3. ¿Qué es PCR en tiempo real?
4. PCR vs PCR en tiempo real en forma tabular
5. Resumen - PCR vs PCR en tiempo real

¿Qué es PCR??

La idea básica de la reacción en cadena de PCR o polimerasa es que dos cebadores, que son complementarios a los hilos opuestos de una secuencia de ADN, están orientados entre sí; Los cebadores producen hilos complementarios, cada uno que contiene el otro cebador. Por lo tanto, el resultado es una gran cantidad de una secuencia correspondiente al ADN que se encuentra entre los dos cebadores. La enzima de ADN polimerasa se usa para extender los cebadores en PCR. La ADN polimerasa es una enzima termoestable, y tiene la capacidad de sobrevivir en altas temperaturas (94 a 95 ° C) utilizadas para la desnaturalización del ADN de la plantilla.

La PCR implica tres pasos, a saber, rondas repetidas de desnaturalización, recocido de cebadores y síntesis de ADN. Se utiliza una máquina termocicladora para realizar esta reacción para que pueda programarse para cambiar las temperaturas de manera rápida y precisa. Las aplicaciones de PCR incluyen investigaciones criminales, huellas dactilares de ADN, detección de patógenos y análisis de ADN de especies humanas tempranas.

¿Qué es la PCR convencional??

Hay tres etapas principales de PCR convencional: Etapa de amplificación de ADN, separación de PCR y detección de productos. La separación de segmentos de ADN se realiza típicamente mediante electroforesis en gel de agarosa. Los productos se tiñen con bromuro de etidio. Finalmente, la detección se logra mediante la visualización de bandas en geles bajo luz UV. Por lo tanto, los resultados finales de la PCR convencional no se expresan como números. La PCR normalmente convencional solo puede detectar un solo parámetro.

¿Qué es PCR en tiempo real??

La PCR en tiempo real puede detectar la amplificación de los productos, ya que los productos se sintetizan. Con el desarrollo de la tecnología, la PCR se ha convertido en una técnica muy popular, especialmente para la detección e identificación de bacterias en los alimentos. La PCR en tiempo real utiliza un sistema de tinte florescente y termociclador equipado con capacidad de detección fluorescente.

¿Cuál es la diferencia entre PCR y PCR en tiempo real??

La diferencia clave entre PCR y PCR en tiempo real es que la PCR convencional requiere más tiempo, ya que utiliza electroforesis en gel para analizar los productos de PCR amplificados, mientras que la PCR en tiempo real es menos lento, ya que puede detectar amplificaciones durante las primeras fases de la reacción. La PCR en tiempo real recopila datos en la fase de crecimiento exponencial de la PCR, mientras que la PCR tradicional recopila datos al final de la reacción. Además, los resultados del punto final de la PCR convencional pueden no ser muy precisos, pero los resultados de la PCR en tiempo real son muy precisos. Además, la PCR en tiempo real es más sensible que la PCR convencional.

Además, la PCR convencional tiene una resolución muy pobre, mientras que la PCR en tiempo real puede detectar muy pocos cambios debido a la alta resolución. Además, la detección de punto final de PCR convencional tiene un rango dinámico corto, mientras que la detección de PCR en tiempo real tiene un amplio rango dinámico. Además, a diferencia de la PCR convencional, las técnicas de detección automatizadas se encuentran en la PCR en tiempo real. La PCR convencional es más sofisticada y intensiva en el trabajo que la PCR en tiempo real. A diferencia de la PCR en tiempo real, la PCR convencional no puede discriminar entre bacterias muertas y vivas. Además, la PCR en tiempo real utiliza un sistema de tinte fluorescente para detectar los productos, mientras que la PCR convencional utiliza bromuro de etidio y luz UV para visualizar las bandas en el medio de agarosa en el medio de agarosa.

La siguiente infografía presenta las diferencias entre PCR y PCR en tiempo real en forma tabular para la comparación de lado a lado.

Resumen -PCR vs PCR en tiempo real

La diferencia clave entre PCR y PCR en tiempo real es que la PCR convencional requiere más tiempo que la PCR en tiempo real, ya que utiliza electroforesis en gel para analizar los productos de PCR amplificados. Además, la PCR en tiempo real utiliza un sistema de tinte fluorescente para detectar los productos, mientras que la PCR convencional utiliza bromuro de etidio y luz UV para visualizar las bandas en el medio de agarosa en el medio de agarosa.

Imagen de cortesía:

1. "Reacción en cadena de la polimerasa-EN" por Enzoklop-Trabajo propio (CC BY-SA 4.0) a través de Commons Wikimedia