Diferencia entre phusion y Taq polimerasa

Diferencia clave - Phusion vs Taq Polimerasa
 

Las ADN polimerasas son enzimas ampliamente utilizadas en las técnicas de biología molecular y también están naturalmente presentes en todos los organismos que sufren replicación de ADN. Son las enzimas polimerizantes clave que implican durante la replicación. La ADN polimerasa es capaz de agregar nucleótidos al extremo 3 'libre de la cadena de ADN, lo que provoca la extensión de un nuevo hilo. En la actualidad, debido al desarrollo de la biología molecular en el diagnóstico de la enfermedad y las aplicaciones industriales, es importante fabricar polimerasas que tengan diversas propiedades beneficiosas. Esto aumenta la precisión del método y lo convierte en una técnica más rápida. Phusion y Taq polimerasa son dos enzimas de polimerasa termostables producidas comercialmente que se utilizan en aplicaciones moleculares especiales. Phusion es una ADN polimerasa aislada de Pyrococcus furiosus y se usa principalmente en experimentos de clonación para aumentar la fidelidad. La ADN polimerasa Taq es la ADN polimerasa estándar utilizada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y se aísla de la bacteria termostable; Térmico acuático. El diferencia clave Entre las dos enzimas se encuentra el microorganismo fuente. Phusion se aislan del extremófilo, Pyrococcus furiosus Mientras que la polimerasa Taq se aislan del termofilo, Térmico acuático.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. Que es phusion
3. ¿Qué es la polimerasa Taq?
4. Similitudes entre phusion y taq polimerasa
5. Comparación lado a lado - Phusion vs Taq Polymerasa en forma tabular
6. Resumen

Que es phusion?

Phusion ADN polimerasa es una nueva polimerasa que se fabrica aislando la enzima de Pyrococcus furiosus, que es una arquea extremafílica. Estos microbios residen en condiciones de temperatura extremadamente alta, lo que hace que la polimerasa sea una polimerasa altamente estable. La phusión polimerasa se usa para obtener fidelidad extrema sobre la polimerasa termostable convencional; Polimerasa taq. La phusion polimerasa es capaz de amplificar plantillas largas hasta 7.5kb de ADN genómico. La capacidad de polimerización óptima de la fusión polimerasa está en 72⁰ C. Phusion también se usa en la clonación de productos para la secuenciación, análisis de expresión y análisis de mutación.

Phusion La ADN polimerasa tiene la actividad de exonucleasa de 3 ' - 5'. Esto permite la revisión de la cadena recién sintetizada después de la síntesis. Por lo tanto, los desajustes de nucleótidos se reparan fácilmente. Por lo tanto, tiene una tasa de error menor. Las ventajas generales de la fusión polimerasa son;

• Fidelidad extrema
• Alta velocidad y tiempo de extensión reducido
• Reacciones robustas y requiere una optimización mínima
• Alto rendimiento

Figura 01: Phusion

La principal desventaja de la fusión polimerasa es que se inhibe en presencia de desoxiuridina trifosfato (DUTP). Cuando los DUT se acumulan en la mezcla de reacción, puede inhibir las acciones de la fusión polimerasa. Esto se evita tratando la mezcla de reacción con dutpasa antes de agregar la enzima. En la actualidad, se usa una variante resistente a DUTP de la phusion polimerasa conocida como PFU Turbo en lugar de Phusion polimerasa como un remedio para este problema.

¿Qué es la polimerasa Taq??

ADN polimerasa taq La invención ha revolucionado el campo de la biología molecular. Resolvió un problema importante en la amplificación del ADN. La ADN polimerasa Taq es una enzima polimerasa estable al calor extraída y aislada de la bacteria termofílica, Térmico acuático. El descubrimiento de esta enzimas conduce al desarrollo de la PCR. Esta enzima ha permitido el uso de la reacción en cadena de la polimerasa en la amplificación del ADN en lugar de las técnicas de clonación laboriosas convencionales. La PCR ahora se usa en diagnósticos moleculares, campos agrícolas e industriales con muchas variaciones nuevas agregadas a la técnica.

Figura 02: Polimerasa Taq

TAQ DNA polimerasa funciona en el rango de temperatura óptimo entre 72⁰C - 80⁰C. La ADN polimerasa Taq requiere un co-factor; magnesio para su función. La polimerasa Taq no tiene la capacidad de corrección de pruebas de 3 ' - 5', por lo tanto, la tasa de error de la ADN polimerasa Taq es alta en comparación con los tipos más nuevos de ADN polimerasas como la phusion polimerasa, etc. Pero, la popularidad de la ADN polimerasa Taq sigue siendo la misma en todo el mundo de la ciencia debido a la conveniencia y la flexibilidad de la enzima.

¿Cuáles son las similitudes entre Phusion y Taq Polymerasa??

• Las enzimas de phusion y Taq polimerasa son enzimas polimerizantes que son capaces de agregar nucleótidos al extremo libre de 3 'de la cadena de ADN.
• Tanto las polimerasas de phusion como Taq requieren una secuencia de cebadores para iniciar la polimerización.
• Tanto las polimerasas de Phusion como Taq son estables en el calor.
• Tanto las polimerasas de Phusion como Taq se usan en mecanismos de PCR para amplificar el ADN.
• Al agregar la polimerasa a la mezcla de reacción, se agregan tanto la fusión como las polimerasas Taq para garantizar la eficiencia de la enzima.
• Tanto las polimerasas de phusion como Taq se sintetizan comercialmente para fines experimentales de biología molecular.
• Tanto las polimerasas de Phusion como Taq requieren un cofactor para completar su función.

¿Cuál es la diferencia entre Phusion y Taq Polymerasa??

Resumen - Phusion vs Taq polimerasa

Phusion y Taq ADN polimerasa son dos polimerasas estables de calor que se utilizan en técnicas de PCR. Phusion es una polimerasa aislada del extremófilo, Pyrococcus furiosus Mientras que, Taq está aislado de las bacterias termostables Térmico acuático. El descubrimiento de ADN polimerasa Taq conduce a la invención de PCR. Phusion tiene muchas ventajas sobre TAQ que ha hecho que Phusion sea una mejor opción para producir ADN de alta fidelidad. Sin embargo, la polimerasa Taq todavía se usa como enzima polimerasa estándar en PCR. Esta es la diferencia entre phusion y taq polimerasa.

Referencia:

1.Biolabs, Nueva Inglaterra. “Taq ADN polimerasas."New England Biolabs: Reactivos para la industria de las ciencias de la vida. Disponible aquí  
2."ADN polimerasa de phusión."Biolabs de Nueva Inglaterra. Disponible aquí 

Imagen de cortesía:

1.'Gam ilustrado por nivin nasri'by nivinn - trabajo propio, (cc by -sa 4.0) a través de Commons Wikimedia  
2.'Taq'by adenosina - trabajo propio, (cc by -sa 3.0) a través de Commons Wikimedia