Diferencia entre sondas radiactivas y no radiactivas
El diferencia clave entre las sondas radiactivas y no radiactivas es que Las sondas radiactivas son secuencias de ADN o ARN de cadena única que están marcadas con isótopos radiactivos, mientras que las sondas no radiactivas son secuencias de ADN o ARN de cadena única que están marcadas con una etiqueta química o una etiqueta fluorescente.
La hibridación de ácido nucleico es una técnica importante en la biología molecular, especialmente en el diagnóstico microbiano. Ayuda a identificar o detectar una secuencia de ácido nucleico particular. En esta técnica, los ácidos nucleicos se fijan a una superficie sólida y se hibridan con una sonda. Una sonda es un fragmento de ADN o ARN que es complementario a una secuencia de interés. Si la secuencia objetivo está presente en la muestra, la sonda hibridará con ella y la hará detectable. Hay dos tipos de sondas como sondas radiactivas y no radiactivas. Por lo tanto, podemos etiquetar las sondas con una etiqueta radiactiva o una etiqueta fluorescente.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué son las sondas radiactivas?
3. ¿Qué son las sondas no radiactivas?
4. Similitudes entre sondas radiactivas y no radiactivas
5. Comparación lado a lado: sondas Radioactivas vs no radiactivas en forma tabular
6. Resumen
¿Qué son las sondas radiactivas??
Las sondas radiactivas son los fragmentos de ADN o ARN monocatenario con una etiqueta radiactiva. Los radioisótopos se utilizan en la preparación de sondas radiactivas. Radioisótopos 32PAG, 33P y 35S se usan comúnmente en el etiquetado de las sondas. Además, radioisotopes 3Mano 1251 también se utilizan en menor medida en el etiquetado de las sondas. Pero se utilizan para aplicaciones específicas. Entre diferentes radioisótopos, 32P es el isótopo más utilizado en el etiquetado de las sondas radiactivas.
Las sondas radiactivas proporcionan un mayor grado de fiabilidad y especificidad. Por lo tanto, proporcionan la máxima sensibilidad y permiten una cuantificación precisa de las secuencias objetivo. Sin embargo, hay varias desventajas asociadas con sondas radiactivas. Tienen vidas medias cortas. Además, son peligrosos y la producción, el uso y la eliminación son problemáticos cuando se manejan. Además, la preparación de la sonda radiactiva es un proceso costoso. Por lo tanto, debido a los problemas y el costo de seguridad, las sondas radiactivas no se utilizan como sondas no radiactivas hoy en día.
¿Qué son las sondas no radiactivas??
Las sondas no radiactivas son el segundo tipo de sondas que están etiquetadas químicamente. La digoxigenina es una sonda no radiactiva, que es un marcador basado en anticuerpos. Las sondas de digoxigenina son específicas y sensibles. La biotina es otra etiqueta utilizada en la preparación de la sonda no radiactiva. Los sistemas de biotina/estreptavidina y digoxigenina/detección de anticuerpos son las sondas no radiactivas más utilizadas en la hibridación. Además, el sistema de peroxidasa de rábano picante es otro sistema de sonda no radioactivo. Una vez que estas sondas no radiactivas se hibridan con las secuencias objetivo, se pueden detectar a través de la autorradiografía u otras técnicas de imagen.
Figura 01: Hibridación con sondas no radiactivas
Las sondas no radiactivas se usan con mayor frecuencia en la hibridación de ácido nucleico que las sondas radiactivas. Esto se debe a que las sondas no radiactivas no están asociadas con materiales peligrosos. Además, los métodos de detección no radiactivos requieren tiempos de exposición más cortos para detectar la señal de hibridación. Sin embargo, los pasos involucrados en la hibridación de ADN con sondas no radiactivas suelen ser tediosos y lentos. Además, las soluciones disponibles comercialmente son caras.
¿Cuáles son las similitudes entre las sondas radiactivas y no radiactivas??
- Las sondas radiactivas y no radiactivas son dos tipos de sondas utilizadas en la hibridación de ácido nucleico.
- Facilitan la detección de secuencias objetivo en la muestra.
- Ambos tipos de sondas son igualmente sensibles y específicos.
¿Cuál es la diferencia entre las sondas radiactivas y no radiactivas??
Las sondas radiactivas son las secuencias de ADN o ARN monocatenarios marcadas con isótopos radiactivos, mientras que las sondas no radiactivas son las secuencias de ADN o ARN de cadena monocatenina marcadas con una etiqueta química. Entonces, esta es la diferencia clave entre las sondas radiactivas y no radiactivas. Además, los isótopos radiactivos son peligrosos. Por lo tanto, las sondas radiactivas son considerablemente peligrosas, mientras que las sondas no radiactivas no son peligrosas.
Además, otra diferencia entre las sondas radiactivas y no radiactivas son sus desventajas. Las medias vidas cortas y los peligros asociados con su producción, uso y eliminación son las desventajas del uso de sondas radiactivas. Por otro lado, los pasos involucrados en la hibridación de ADN con sondas no radiactivas suelen ser tediosos y lentos.
A continuación, la infografía muestra más comparaciones relacionadas con la diferencia entre las sondas radiactivas y no radiactivas.
Resumen -Sondas Radioactivas vs Radioactivas
Una sonda es un fragmento de ADN o ARN que contiene una secuencia de nucleótidos que es complementaria a la secuencia de interés. Para detectar la secuencia objetivo, las sondas se pueden etiquetar radioactiva, fluorescente o químicamente. Las sondas se unen con secuencias complementarias en la muestra. Las sondas radiactivas están etiquetadas con isótopos radiactivos, mientras que las sondas no radiactivas están etiquetadas con biotina, digoxigenina o peroxidasa de rábano picante. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre las sondas radiactivas y no radiactivas.
Referencia:
1. "Sonda de hibridación". Interno.Wikipedia.Org, 2020, disponible aquí.
Imagen de cortesía:
1. "Resultados de la hibridación in situ de las sondas del cromosoma X e Y BAC" por Joanne H. Hsu, Hui Zeng, Kalistyn H. Lemke, Aris A. Polyzos, Jlingy F. Weier, Mei Wang, Anna R. Lawin-O'Brien, Heinz-Ulrich G. Weier y Benjamin O'Brien - Joanne H. Hsu et al. "Repitas de ADN específicas del cromosoma: identificación rápida en silico y validación utilizando la hibridación in situ de fluorescencia" int. J. Moles. LME. 2013, 14 (1), 57-71; doi: 10.3390/IJMS14010057 (CC por 3.0) a través de Commons Wikimedia
