Diferencia entre la fase inversa y la fase normal HPLC

El diferencia clave entre la fase inversa y la fase normal HPLC es que el HPLC de fase inversa utiliza una fase estacionaria no polar y una fase móvil polar, mientras que la fase normal HPLC utiliza una fase estacionaria polar y una fase móvil menos polar.

La fase normal HPLC es la técnica más antigua de HPLC que Tswett usó en sus separaciones de extractos de plantas; Usó tiza en una columna de vidrio. Este fue el modo clásico de cromatografía que llevó a nombrarlo como la técnica "normal". HPLC de fase invertida, por otro lado, es lo opuesto a la técnica normal, que los científicos desarrollaron últimamente.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es HPLC de fase inversa?
3. ¿Qué es la fase normal HPLC?
4. Comparación lado a lado: fase inversa frente a HPLC de fase normal en forma tabular
5. Resumen

¿Qué es HPLC de fase inversa??

HPLC de fase inversa es una técnica cromatográfica en la que utilizamos una fase estacionaria hidrófoba. Entre todos los métodos de HPLC, utilizamos este método para aproximadamente el 70% debido a su amplia aplicabilidad y reproducibilidad. La fase estacionaria no es polar y la fase móvil es polar.

La mayoría de las veces, los científicos usan una mezcla acuosa de agua con un solvente orgánico polar miscible, como acetonitrilo o metanol como fase móvil. Por lo tanto, los analitos interactúan con la fase estacionaria no polar.

¿Qué es la fase normal HPLC??

Fase normal HPLC es una técnica cromatográfica en la que utilizamos una fase estacionaria hidrofílica. Es el método tradicional de HPLC, aunque no lo usamos tanto. La fase estacionaria es polar, y la fase móvil no es polar. Más importante aún, la fase móvil de esta técnica es 100% orgánica. Significa que no se usa agua para esto.

Figura 01: Un perfil de muestra para cromatogramas de HPLC de fase normal y fase inversa según la polaridad de los componentes en el analito.

Típicamente, la fase estacionaria contiene sílice, ciano, diol, fases de unión amino, etc. Las fases móviles incluyen solventes orgánicos como hexano, acetato de etilo, etc. Esta técnica basa en la retención de moléculas de solvente o analito en la fase estacionaria polar.

¿Cuál es la diferencia entre la fase inversa y la fase normal HPLC??

HPLC de fase inversa es una técnica cromatográfica en la que utilizamos una fase estacionaria hidrófoba. La fase estacionaria de esta técnica no es polar, mientras que la fase móvil es polar. Además, los científicos usan una mezcla acuosa de agua con un disolvente orgánico polar miscible, como acetonitrilo o metanol como la fase móvil en la fase inversa HPLC. En contraste, la fase normal HPLC es una técnica cromatográfica en la que usamos una fase estacionaria hidrofílica. La fase estacionaria de esta técnica es polar, mientras que la fase móvil no es polar. Además de eso, los científicos usan solventes orgánicos como hexano, acetato de etilo, etc. Como la fase móvil de la fase normal HPLC. La siguiente infografía presenta la diferencia entre la fase inversa y la fase normal HPLC en forma tabular.

Resumen -Fase inversa vs HPLC de fase normal

Las técnicas de HPLC de fase inversa y de fase normal son dos técnicas cromatográficas líquidas. La diferencia clave entre la fase inversa y la fase normal HPLC es que la fase inversa HPLC utiliza una fase estacionaria no polar y una fase móvil polar, mientras que la fase normal HPLC utiliza una fase estacionaria polar y una fase móvil menos polar.

Referencia:

1. Aguas. "Modos de separación de HPLC."HPLC - Cromatografía líquida de alto rendimiento explicada: aguas. Disponible aquí