Diferencia entre RP HPLC y HIC
El diferencia clave entre RP HPLC y HIC es que RP HPLC utiliza una fase móvil más polar y una fase estacionaria menos polar. Mientras que HIC utiliza una fase estacionaria hidrófoba que permite que las moléculas hidrofóbicas se unan a ella.
La cromatografía es una técnica analítica que ayuda a separar una mezcla en sus componentes. Primero, tenemos que disolver la muestra para separarse en una solución. Esta mezcla de sustancia de solución se llama fase móvil. Entonces la fase móvil se pasa a través de otro material llamado fase estacionaria. La fase estacionaria determina la separación de los componentes. La separación ocurre debido a la división del material entre la fase móvil y la fase estacionaria.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es RP HPLC?
3. Que es hic
4. Comparación de lado a lado -RP HPLC VS. HIC en forma tabular
5. Resumen
¿Qué es RP HPLC??
El término RP HPLC significa Cromatografía líquida de alto rendimiento de fase inversa. Implica la separación de componentes en una mezcla, según la hidrofobicidad. Los componentes hidrofóbicos en el enlace de la fase móvil con los ligandos hidrofóbicos inmovilizados en la fase estacionaria, mientras que los componentes hidrofílicos elean a través de la fase estacionaria sin unirse a la superficie de la fase estacionaria.
Figura 01: Aparato HPLC
Además, este método tiene más reproducibilidad en comparación con otras técnicas cromatográficas, y también muestra una amplia aplicabilidad. Por lo tanto, utilizamos este método en laboratorios para más del 75% de todos los métodos de HPLC. La mayoría de las veces, utilizamos una mezcla acuosa de agua con un solvente orgánico polar miscible como fase móvil. Por lo tanto, garantizará la unión de los componentes hidrofóbicos en la solución a la superficie de la fase estacionaria.
Que es hic?
El término HIC representa Cromatografía de interacción hidrofóbica. Es un tipo de HPLC de fase inversa, y este método se usa principalmente para la separación de grandes biomoléculas como las proteínas. En este método, necesitamos usar un medio acuoso para hacer la muestra de la biomolécula. Es porque los solventes orgánicos pueden causar desnaturalización de las proteínas. Además, esta técnica utiliza la interacción entre moléculas grandes con una superficie ligeramente hidrófoba de la fase estacionaria. Además, tenemos que usar una alta concentración de sal en la muestra porque alienta a la proteína a retener en el embalaje; Este proceso se llama saling. Al disminuir la concentración de sal gradualmente, podemos hacer que las biomoléculas eluden por separado de acuerdo con su hidrofobicidad.
Por lo general, este método utiliza las condiciones opuestas a las de la cromatografía de intercambio iónico. En esta técnica, primero, necesitamos pasar una solución de amortiguación a través de la columna para reducir la solvatación del soluto en la muestra. Hace que las regiones hidrofóbicas de la proteína expongan. Sin embargo, cuando la molécula es más hidrofóbica, se requiere menos sal para promover la unión. Aquí, los solutos menos hidrófobos se eluyen primero, y según el cambio en la concentración de sal, se eluyen más solutos hidrófobos.
¿Cuál es la diferencia entre RP HPLC y HIC??
La cromatografía es una técnica analítica para la separación de componentes en una mezcla. RP HPLC y HIC son dos técnicas cromatográficas especializadas. La diferencia clave entre RP HPLC y HIC es que RP HPLC utiliza una fase móvil más polar y una fase estacionaria menos polar, mientras que HIC usa una fase estacionaria hidrofóbica, lo que permite que las moléculas hidrofóbicas se conecten a ella.
La siguiente infografía resume la diferencia entre RP HPLC y HIC.
Resumen -RP HPLC VS. Hic
La cromatografía es una técnica analítica para la separación de componentes en una mezcla. RP HPLC y HIC son dos técnicas cromatográficas especializadas. La diferencia clave entre RP HPLC y HIC es que RP HPLC utiliza una fase móvil más polar y una fase estacionaria menos polar, mientras que HIC usa una fase estacionaria hidrofóbica, que permite que las moléculas hidrofóbicas se unan a ella.
Referencia:
1. "Modos de separación de HPLC."Aguas, disponibles aquí.
Imagen de cortesía:
1. "HPLC preparativo" de Gyassinemrabettalk✉ Esta imagen vectorial W3C-Unpeced se creó con Inkscape. - Trabajo propio (CC por 3.0) a través de Commons Wikimedia
