Diferencia entre la página SDS y la transferencia Western
Diferencia de clave - Página SDS vs Western Blot
Western Blotting es una técnica que detecta una proteína específica de una muestra de proteína. Esta técnica se realiza a través de varios pasos clave: electroforesis en gel, transferencia e hibridación. Electroforesis en gel de poliacrilamida de dodecil sulfato de sodio (Página SDS) es un tipo de técnica de electroforesis en gel que se utiliza para separar las proteínas de acuerdo con sus tamaños (pesos moleculares). Western Blot es una hoja especial de una membrana transparente que se utiliza para transferir el mismo patrón de las proteínas en la página SDS. La diferencia clave entre la página SDS y Western Blot es que La página SDS permite la separación de proteínas en una mezcla mientras Western Blot permite la detección y cuantificación de una proteína específica de una mezcla. Ambos son útiles en los estudios de análisis de proteínas.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la página SDS?
3. ¿Qué es la mancha occidental?
4. Comparación de lado a lado - Página SDS vs Western Blot
5. Resumen
¿Qué es la página SDS??
La página SDS es una técnica de electroforesis en gel utilizada para la separación de proteínas. Se usa comúnmente en bioquímica, genética, forense y biología molecular. Una vez que las proteínas se extraen de la muestra, se ejecutan en un gel compuesto por SDS y poliacrilamida. SDS es un detergente aniónico que se usa para linealizar las proteínas (proteínas desnectas) e impartir una carga negativa a proteínas linealizadas proporcionales a su masa molecular. La poliacrilamida se convierte en el sólido apoyo para el gel. Las proteínas desnaturalizadas que se cargan negativamente migran hacia el extremo positivo del aparato a través del gel. Según los tamaños de las proteínas, las velocidades migratorias difieren entre las proteínas y se producen la separación. Por lo tanto, la página SDS es útil para la separación de proteínas individuales en función de sus tamaños.
La preparación del gel de poliacrilamida para el fraccionamiento de proteínas es un paso crucial en la página SDS. La concentración correcta de poliacrilamida y el tipo de agente de reticulación utilizado afectan fuertemente las propiedades físicas del gel, lo que hace que la separación real de las diferentes proteínas. Los tamaños de poro del gel deben administrarse adecuadamente para una separación efectiva. Sin embargo, la página SDS se considera una técnica de separación de proteínas de alta resolución.
La técnica de página SDS tiene una limitación importante en el análisis de proteínas. Dado que las proteínas SDS denaturan antes de la separación, no permite la detección de actividad enzimática, interacciones de unión a proteínas, cofactores de proteínas, etc.
Figura 01: página SDS
¿Qué es la mancha occidental??
La técnica de transferencia Western permite la detección de una proteína específica de una mezcla de proteínas y la medición de la cantidad y el peso molecular de la proteína. Western Blot es la membrana utilizada durante el procedimiento de transferencia para obtener la imagen del espejo de los patrones de proteínas en el gel de poliacrilamida SDS. La membrana que se usa para la transferencia Western está compuesta principalmente de nitrocelulosa o difluoruro de polivinilideno (PVDF). La membrana con la proteína transferida se puede usar para identificar la proteína deseada. Requiere anticuerpo de alta calidad para la detección de la proteína deseada por hibridación. El anticuerpo se une a su antígeno específico y revela la presencia del antígeno deseado que es una proteína.
La transferencia de las proteínas del gel de poliacrilamida SDS a la transferencia Western se realiza mediante electroblotting. Es un método efectivo y rápido que hace que las proteínas sean electroforeses fuera del gel y pasen a la membrana de nitrocelulosa (transferencia Western).
Figura 02: Western Blot
¿Cuál es la diferencia entre la página SDS y Western Blot??
Página SDS vs Western Blot | |
| La página SDS es una técnica de electroforesis en gel. | Western Blot es una técnica que se realiza en una membrana para detectar una proteína específica de una mezcla. |
| Usar | |
| La página SDS permite la separación de proteínas de acuerdo con sus tamaños. | Western Blot permite la transferencia de proteínas en el gel de página SDS sin cambiar su patrón y permite la hibridación con anticuerpos específicos. |
| Desventajas | |
| La desnaturalización de proteínas, el alto costo y la presencia de productos químicos de neurotoxina son las desventajas de esta técnica. | Esta técnica requiere mucho tiempo y requiere una buena condición controlada personal y específica experimentada. |
Resumen -Página SDS vs Western Blot
SDS Page y Western Blot son dos métodos involucrados en el análisis de proteínas. La página SDS permite una fácil separación de proteínas en un gel de acuerdo con su peso molecular. Western Blot ayuda a confirmar la presencia y la cantidad de una proteína específica a través de la hibridación con anticuerpos específicos. Esta es la diferencia entre la página SDS y Western Blot.
Referencias:
1. Blancher, C., y un. Jones. "SDS -Page y técnicas de transferencia Western."Métodos en medicina molecular. U.S. Biblioteca Nacional de Medicina, N.d. Web. 27 mar. 2017
2. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig y David H. Petición. "SDS-PAGE nativa: separación electroforética de alta resolución de proteínas con retención de propiedades nativas, incluidos los iones metálicos unidos."Metalómica: ciencia biometal integrada. U.S. Biblioteca Nacional de Medicina, mayo de 2014. Web. 27 mar. 2017.
Imagen de cortesía:
1. "Electroforesis SDS-PAGE" de Bensaccount en English Wikipedia (CC por 3.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Western Blot 114a" de Amanthabagdon - Trabajo propio (dominio público) a través de Commons Wikimedia
