Diferencia entre el gel de apilamiento y la separación del gel
Diferencia de claves: apilamiento de gel vs separación Gel
Los términos apilando el gel y el gel de separación se utilizan para explicar la técnica SDS-PAGE. La electroforesis en gel SDS-PAGE o Dodecil Sulfato-Poliacrilamida de Sodio es una técnica de laboratorio que se utiliza para separar las moléculas de proteínas basadas en sus pesos moleculares. La teoría detrás de la técnica es que las proteínas con diferentes pesos moleculares muestran diferentes tasas de migración; Las moléculas de bajo peso molecular migran más rápido, mientras que las moléculas de alto peso molecular migran lentamente. El medio para la migración es un gel. Hay dos tipos de geles nombrados como gel de apilamiento y gel de separación. El diferencia clave Entre apilar gel y separar gel es que El ph del gel de apilamiento es 6.8 mientras que el pH del gel de separación es 8.8.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es el gel de apilamiento?
3. Que es separar el gel
4. Relación entre apilar gel y separar gel
5. Comparación lado a lado: gel de apilamiento vs separación de gel en forma tabular
6. Resumen
¿Qué es el gel de apilamiento??
El gel de apilamiento es un gel de poliacrilamida de baja concentración que se coloca en la parte superior del gel de resolución más concentrado (gel de separación) en la técnica SDS-PAGE. El gel de apilamiento se utiliza para mejorar la resolución de la electroforesis. La resolución aumenta debido a la diferencia entre las concentraciones de apilamiento del gel y la resolución del gel que afectan las proteínas en la muestra. Dado que la concentración de poliacrilamida en el apilamiento del gel es baja, el tamaño de los poros es más alto. Esto también ayuda a aumentar la separación.
El gel de apilamiento es un gel de poliacrilamida suelto con grandes poros de aproximadamente 7% de poliacrilamida. Estos poros no actúan como una barrera considerable para moléculas de proteínas grandes. Por lo tanto, este gel afecta ligeramente la movilidad de esas proteínas. Esto hace que la separación de acuerdo con la movilidad y el tamaño de la proteína concentrándolas entre dos geles.
Figura 01: gel de acrilamida SDS-PAGE
El ph del gel de apilamiento es 6.8. Su pH es ácido que el de resolver gel en 2 unidades de pH. Este pH implica una menor resistencia iónica, por lo tanto, una mayor resistencia eléctrica. Esto provoca la movilidad de las proteínas que otras partículas cargadas presentes en el gel.
Que es separar el gel?
Separar gel o resolver el gel de un SDS-Pagetechnique es un gel de poliacrilamida altamente concentrado que se coloca en la parte superior del gel de apilamiento de bajo concentrado. El gel de separación contiene una gran cantidad de poliacrilamida (10%). El pH de este gel se mantiene como ph = 8.8, que es un nivel de pH más alto que el del gel de apilamiento.
Figura 02: un aparato de electroforesis en gel
Cuando las moléculas de proteína alcanzan el gel de separación, la migración de esas moléculas se ralentiza porque el gel de separación es un gel de alta concentración con un pequeño tamaño de poro que puede actuar como una barrera considerable para el movimiento de las moléculas de proteínas. Esta desaceleración permite que las otras proteínas migren lentamente para ponerse al día, lo que resulta en una banda estrecha y concentrada entre los dos geles.
¿Cuál es la relación entre apilar gel y separar gel??
- Tanto el gel de apilamiento como los tipos de gel de separación se utilizan en el mismo aparato.
¿Cuál es la diferencia entre apilar gel y separar gel??
Gel de apilamiento vs separación de gel | |
| El gel de apilamiento es un gel de poliacrilamida de baja concentración que se coloca en la parte superior del gel de resolución más concentrado (gel de separación) en la técnica SDS-PAGE. | Separar el gel o resolver el gel de una técnica SDS-PAGE es un gel de poliacrilamida altamente concentrado que se coloca en la parte superior de un gel de apilamiento de baja concentración. |
| Colocación | |
| El gel de apilamiento se coloca en el gel de resolución (separación). | Se coloca el gel de separación en la parte inferior del recipiente utilizado para la electroforesis en gel. |
| Concentración | |
| La concentración de gel de apilamiento es alta. | La concentración de gel de separación es baja. |
| Contenido de poliacrilamida | |
| El gel de apilamiento contiene aproximadamente 7% de poliacrilamida. | La separación del gel contiene aproximadamente 10% de poliacrilamida. |
| ph | |
| El ph del gel de apilamiento es 6.8. | El pH del gel de separación es 8.8. |
| Tamaño de poro | |
| Los grandes tamaños de los poros están presentes en el gel de apilamiento. | Los pequeños tamaños de los poros están presentes en la separación del gel. |
| Resolución | |
| Apilar gel da una mejor resolución. | Separar gel da una resolución deficiente. |
Resumen - Apilamiento de gel vs separación Gel
El gel de apilamiento y el gel de separación son dos tipos de geles de poliacrilamida utilizados para obtener una mejor separación de las moléculas de proteínas en una muestra dada. La diferencia entre apilar gel y separar gel es que el pH del gel de apilamiento es 6.8 mientras que el pH del gel de separación es 8.8.
Referencia:
1."Electroforesis en gel de poliacrilamida."Electroforesis en gel de poliacrilamida (teoría): Biología molecular Virtual Lab II: Biotecnología e Ingeniería Biomédica: Amrita Vishwa Vidyapeetham Laboratorio virtual. Disponible aquí
2."Cómo funciona SDS-PAGE."Bitesize Bio, 16 de febrero. 2018. Disponible aquí
3."SDS-PAGE PLATING GEL-BICH 608 (Polymenis-Pettigrew)."Sitios de Google. Disponible aquí
Imagen de cortesía:
1.'SDS-PAGE ACRYlamide Gel'by Bensaccount en English Wikipedia, (CC por 3.0) a través de Commons Wikimedia
2.'Aparato de electroforesis en gel' por Jeffrey M. Vinocur - Trabajo propio, (CC -by 2.5) Vía Commons Wikimedia
