Diferencia entre el gradiente de sacarosa y la ultracentrifugación del cojín de sacarosa

El diferencia clave Entre el gradiente de sacarosa y la ultracentrifugación del cojín de sacarosa es que En la ultracentrifugación de gradiente de sacarosa, se usa un gradiente continuo de sacarosa, mientras que en la ultracentrifugación de cojín de sacarosa, se usa un gradiente de sacarosa discontinuo.

El gradiente de sacarosa y la ultracentrifugación del cojín de sacarosa son dos tipos similares de técnicas utilizadas para separar tipos específicos de macromoléculas. En ambas técnicas, se utiliza un gradiente de densidad de sacarosa. Pero en la ultracentrifugación del gradiente de sacarosa, se usa un gradiente de densidad continua mientras, en la ultracentrifugación de cojín de sacarosa, se usa un gradiente de densidad discontinua.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la ultracentrifugación de gradiente de sacarosa?
3. ¿Qué es la ultracentrifugación del cojín de sacarosa?
4. Similidades entre el gradiente de sacarosa y la ultracentrifugación de cojín de sacarosa
5. Comparación de lado a lado: gradiente de sacarosa vs ultracentrifugación de cojín de sacarosa en forma tabular
6. Resumen

¿Qué es la ultracentrifugación de gradiente de sacarosa??

La ultracentrifugación de gradiente de sacarosa es una técnica que puede usarse para fraccionar macromoléculas como el ADN, el ARN y las proteínas. Hay varios pasos en esta técnica. Son preparación de gradiente de sacarosa, centrifugación, separación y elución. La preparación de gradiente es el paso clave en esta técnica. En esta técnica, la muestra que contiene macromoléculas de diferentes tamaños está en capas en la superficie de una columna de gradiente de sacarosa. Cuando se centrifugó, el sedimento de macromoléculas de diferentes tamaños a través de la columna de gradiente de sacarosa a diferentes tasas. La sedimentación depende de varios factores, incluida la fuerza de centrifugación, la forma del tamaño y la densidad de las macromoléculas, la densidad y la viscosidad del gradiente. Al final de la centrifugación, las macromoléculas se separan espacialmente por densidad. Macromoléculas más grandes (macromoléculas de alta densidad) sedimento hacia el fondo. Los más ligeros (macromoléculas de baja densidad) permanecen en la parte superior del gradiente. Por lo tanto, las moléculas se separan como diferentes bandas. Entonces las bandas deben separarse, y la purificación de la macromolécula específica de la sacarosa debe hacerse.

Figura 01: ultracentrifugación de gradiente de sacarosa

En el lado de la aplicación, este método se utiliza ampliamente para el fraccionamiento de moléculas de ADN. La ultracentrifugación de gradiente de sacarosa se usa comúnmente para caracterizar el tamaño y la composición del complejo de proteínas. Además, esta técnica se utiliza para la purificación parcial del ARNm.

¿Qué es la ultracentrifugación del cojín de sacarosa??

La ultracentrifugación del cojín de sacarosa es otra técnica que permite el fraccionamiento de macromoléculas. A diferencia de la ultracentrifugación del gradiente de densidad de sacarosa, la ultracentrifugación de cojín de sacarosa utiliza un gradiente de densidad discontinua. La concentración de sacarosa aumenta de arriba a abajo en pasos discretos. En esta técnica, la separación se logra colocando el extracto clarificado sobre un pequeño volumen de una solución de sacarosa en un tubo de centrífuga, el llamado cojín de sacarosa. Esto permite una mejor separación en la centrifugación de alta velocidad. Cuando las moléculas se separan como una banda entre el cojín de sacarosa, la banda blanca se puede recolectar y purificar. Además, las impurezas se pueden eliminar más mediante el método de cojín de sacarosa. El método de cojín de sacarosa permite que el 60-70% del tubo se llene con la muestra. Por lo tanto, el método de cojín de sacarosa permite procesar un mayor volumen de muestra.

¿Cuáles son las similitudes entre el gradiente de sacarosa y la ultracentrifugación del cojín de sacarosa??

• El gradiente de sacarosa y la ultracentrifugación del cojín de sacarosa son dos técnicas que se utilizan para separar una mezcla de macromoléculas.
• En ambos métodos, se utiliza un gradiente de sacarosa.
• La centrifugación es un paso en ambos métodos.
• El sedimento de las moléculas como banda o zona en cada método.

¿Cuál es la diferencia entre el gradiente de sacarosa y la ultracentrifugación del cojín de sacarosa??

La ultracentrifugación de gradiente de sacarosa es una técnica que utiliza un gradiente continuo de sacarosa en el tubo de centrífuga, mientras que la ultracentrifugación de cojín de sacarosa es una técnica que utiliza un gradiente de sacarosa discontinuo. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre el gradiente de sacarosa y la ultracentrifugación del cojín de sacarosa.

Además, la ultracentrifugación del cojín de sacarosa permite procesar un mayor volumen de la muestra, mientras que la ultracentrifugación de gradiente de sacarosa permite procesar un volumen relativamente bajo de la muestra.

A continuación, la infografía tabula más diferencias entre el gradiente de sacarosa y la ultracentrifugación del cojín de sacarosa.

Resumen -Gradiente de sacarosa vs ultracentrifugación de cojín de sacarosa

La ultracentrifugación de gradiente de sacarosa separa las macromoléculas utilizando un gradiente continuo de sacarosa. En contraste, la ultracentrifugación de cojín de sacarosa utiliza un gradiente de sacarosa discontinuo para separar el tipo de partículas específicas en una mezcla. Entonces, esta es la diferencia clave entre el gradiente de sacarosa y la ultracentrifugación del cojín de sacarosa. El método de cojín de sacarosa permite la recolección de partículas morfológicamente intactas, ya que no causa estrés mecánico, a diferencia de la ultracentrifugación de gradiente de sacarosa, que aplasta a las moléculas al fondo del tubo. Además, la ultracentrifugación del cojín de sacarosa permite procesar un mayor volumen de la muestra que la ultracentrifugación de gradiente de sacarosa.

Referencia:

1. Dijkstra, Jeanne y Cees P. de Jager. "Centrifugación de gradiente de densidad."Springerlink, Springer, Berlín, Heidelberg, 1 de enero. 1998, disponible aquí.

Imagen de cortesía:

1. "Gradiente de densidad"-MLW3559 en English Wikibooks. - Transferido desde EN.wikibooks a los comunes. (CC BY-SA 2.5) Vía Commons Wikimedia