La ADN polimerasa es una enzima que crea un nuevo ADN a partir de sus bloques de construcción (nucleótidos). En procariotas y eucariotas, se encuentran diferentes tipos de ADN polimerasas. La duplicación de ADN es factible debido a la presencia de estas enzimas especiales, y la información genética se pasa a la descendencia por la acción de las ADN polimerasas. Taq polimerasa es un tipo especial de ADN polimerasa que es termostable y se usa ampliamente en PCR. Taq polimerasa se encuentra en bacterias termofílicas y se purifica en in vitro Replicación de ADN. El diferencia clave Entre la Taq polimerasa y la ADN polimerasa es que La polimerasa Taq puede soportar altas temperaturas sin desnaturalizar, mientras que otras desnaturalizaciones de ADN polimerasas a altas temperaturas (a temperaturas degradantes de la proteína).
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la polimerasa Taq?
3. ¿Qué es la ADN polimerasa?
4. Comparación lado a lado: Taq polimerasa vs ADN polimerasa
5. Resumen
Taq polimerasa (ADN polimerasa taq) es una enzima utilizada para sintetizar ADN in vitro por técnica de PCR. Es producido por la bacteria termofílica llamada Térmico acuático que viven en aguas termales y respiraderos térmicos. Taq polimerasa es una enzima termoestable que no se degrada a altas temperaturas. Taq polimerasa se purificó por primera vez y se publicó en Chien et al. en 1976. La técnica de PCR se realiza con la ayuda de la polimerasa Taq debido a su capacidad para tolerar las fluctuaciones de alta temperatura y temperatura durante la PCR. La polimerasa Taq cataliza la síntesis de ADN cuando hay cebadores, nucleótidos y la plantilla monocatenaria ADN. La enzima consiste en un solo polipéptido con un peso molecular de aproximadamente 94 kDa. La polimerasa Taq muestra su actividad óptima a 80 ° C y al rango de 7 - 8 pH con la presencia de iones de magnesio. Tiene actividad de polimerasa y exonucleasa. La enzima está compuesta de una sola cadena de polipéptidos y el gen para la polimerasa Taq contiene un alto contenido de G y C (67.9%).
La polimerasa Taq termostable permite realizar PCR a altas temperaturas que aumentan la especificidad de los cebadores y la reducción de la producción de productos de PCR no deseados (dímeros de cebadores). La polimerasa Taq también elimina la necesidad de agregar nuevas enzimas a la reacción de PCR después de cada ciclo de reacción de PCR debido a su capacidad para soportar altas temperaturas. El descubrimiento de la polimerasa Taq permitió que la PCR funcionara en un solo tubo cerrado en una máquina relativamente simple. Debido a estas propiedades de la polimerasa Taq, la PCR se convierte en una técnica de laboratorio popular realizada rutinariamente en muchos análisis de biología molecular con respecto al análisis de ADN.
La polimerasa Taq se usa ampliamente en técnicas biológicas moleculares, y existe la necesidad de producción de polimerasa Taq a gran escala. Por lo tanto, utilizando la tecnología de ADN recombinante y la clonación de genes, el gen que codificaba la ADN polimerasa Taq se había clonado y expresado en Escherichia coli. Esto ha facilitado enormemente la producción polimerasa recombinante de producción y ha reducido el precio de esta enzima para un uso adecuado.
Figura 1: Polimerasa Taq
La ADN polimerasa es una enzima que cataliza la síntesis de ADN de los nucleótidos. Es la enzima más precisa responsable de duplicar genomas y pasar información genética a la descendencia. Durante la división celular, la ADN polimerasa duplica todo su ADN y pasa una copia a cada celda hija. En 1955, Arthur Kornberg fue descubierto ADN polimerasa en E. coli. La función de la ADN polimerasa depende de varios requisitos; plantilla de ADN, mg+2 iones, los cuatro tipos de desoxinucleótidos (DATP, DTTP, DCTP y D GTP), y una secuencia corta de ARN (cebador). La síntesis del ADN se realiza en la dirección de 5'to 3 'por la ADN polimerasa.
Las ADN polimerasas se pueden agrupar en siete familias diferentes: A, B, C, D, X, Y y RT (transcriptasa inversa). Los retrovirus codifican para RT; Una ADN polimerasa inusual que necesita una plantilla de ARN para la síntesis de ADN. Hay cinco tipos diferentes de ADN polimerasas que se encuentran en procariotas para diferentes roles en la replicación del ADN. La ADN polimerasa 3 es responsable de la polimerización de la nueva hebra de ADN. La ADN polimerasa 1 es responsable de reparar y parchear el ADN. Las ADN polimerasas 2, 4 y 5 son responsables de reparar y revisar el ADN. En los eucariotas, hay 15 tipos distintos de ADN polimerasas. Incluyen cinco familias principales.
Figura 2: ADN polimerasa
Las ADN polimerasas se usan en la clonación de genes, PCR, secuenciación de ADN, detección de SNP, diagnóstico molecular, etc. Taq polimerasa es un tipo de ADN polimerasa que puede tolerar altas temperaturas y estar disponible para la síntesis de ADN sin degradación.
Taq polimerasa vs ADN polimerasa | |
La ADN polimerasa Taq es una enzima que crea ADN. Es una enzima termoestable que se encuentra en los termofilos | La ADN polimerasa es una enzima que facilita la replicación del ADN y se encuentra en los organismos procariotas y eucariotas. |
Degradación a altas temperaturas | |
La polimerasa Taq está activa a altas temperaturas. | Las ADN polimerasas degradan a las altas temperaturas de las proteínas que denaturan las proteínas. |
Usar | |
Esto se usa ampliamente en PCR | Taq polimerasa reemplazó la polimerasa de coli Se usa originalmente en PCR. |
Las ADN polimerasas son las enzimas que sintetizan el ADN de los desoxinucleótidos (bloques de construcción de ADN) cuando la plantilla y los cebadores están disponibles. Se requieren ADN polimerasas para duplicar el ADN de las células y pasar a células hija idénticas durante la división celular. Las ADN polimerasas agregan nuevos nucleótidos al extremo 3 'del cebador y alargan la nueva síntesis de la cadena de ADN en la dirección 5' a 3 '. La ADN polimerasa Taq es una de una enzima de ADN polimerasa que es muy útil en el método de reacción en cadena de polimerasa (PCR) de amplificación de ADN. mi. coli La ADN polimerasa 1 se usó anteriormente para la PCR, pero la polimerasa Taq comercial la suplantó debido a su alta especificidad de la unión del cebador a temperaturas elevadas y la producción de un mayor rendimiento del producto deseado con un producto de amplificación menos no específico. Esta es la diferencia entre la polimerasa Taq y la ADN polimerasa.
Referencia:
1.Ishino, Sonoko y Yoshizumi Ishino. "Las ADN polimerasas como reactivos útiles para la biotecnología: la historia de la investigación del desarrollo en el campo."Fronteras en microbiología. Frontiers Media s.A., 2014. Web. 28 de febrero. 2017
Taq de 2 "y otras ADN polimerasas termoestables."Springer. Springer Países Bajos, 01 de enero. 1970. Web. 28 de febrero. 2017
3.Stillman, Bruce. “ADN polimerasas en la bifurcación de replicación en eucariotas."Célula molecular. U.S. Biblioteca Nacional de Medicina, 09 de mayo de 2008. Web. 28 de febrero. 2017
4.EukaryoticDnapolymerasas - Universidad de Oxford."N.pag., norte.d. Web. 28 de febrero. 2017
Imagen de cortesía:
1. "Taq" por adenosina - Trabajo propio (CC By -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
2. "ADN polimerasa" de Yikrazuul - Trabajo propio (CC By -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia