Los vectores se usan en la clonación molecular. Un vector puede definirse como una molécula de ADN que se comporta como un vehículo para transportar material genético extraño a otra célula. Un vector que contiene ADN extraño se conoce como ADN recombinante y debe tener la capacidad de replicarlo y expresarlo dentro del organismo del huésped. Cromosoma artificial de levadura (YAC) y cromosoma artificial bacteriano (BAC) son dos tipos de vectores involucrados en la clonación. La diferencia clave entre YAC y BAC es que YAC es un sistema vectorial construido artificialmente que utiliza una región específica del cromosoma de levadura para insertar grandes segmentos de materiales genéticos a las células de levadura mientras BAC es un sistema vectorial construido artificialmente que utiliza una región específica de mi. coli cromosoma para insertar grandes segmentos de ADN en mi. coli células.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué son los vectores YAC?
3. ¿Qué son los vectores de BAC?
4. Comparación de lado a lado - YAC vs Vectores BAC
5. Resumen
YAC (cromosoma artificial de levadura) es un cromosoma construido artificialmente que tiene la capacidad de transportar un gran segmento de ADN extraño y replicarse dentro de las células de levadura. Tiene un centrómero, telómeros, así como secuencias de replicación de forma autónoma que son esenciales para la replicación y la estabilidad. YAC también debe soportar un marcador o marcadores selectivos y sitios de restricción para que sea un vector de clonación efectivo. Se puede insertar una secuencia grande que oscila entre 1000 kb hasta 2000 kb en YAC y transferirse a levadura. La eficiencia de transformación de YAC es muy baja.
Figura 01: YAC Vector
El cromosoma artificial bacteriano (BAC) es un cromosoma construido artificialmente para la clonación molecular. Tiene regiones específicas de mi. coli F plásmido y es circular y súper enrollado. BAC está desarrollado para clonar fragmentos de ADN a las bacterias, especialmente para mi. coli. Puede soportar fragmentos de ADN que tienen tamaños de hasta 300 kb. En comparación con YAC, los insertos de clonación de BAC son más pequeños en tamaños. Los BAC se desarrollaron en 1992 y todavía es popular debido a su estabilidad y facilidad de construcción. Los BAC también son útiles para desarrollar vacunas.
Figura 02: Vector BAC en la clonación molecular
Yac vs bac vectores | |
YAC es un cromosoma genéticamente diseñado con el uso de ADN de levadura con el fin de clonación. | BAC es una molécula de ADN de ingeniería genéticamente que usa mi. coli ADN con el propósito de clonación. |
Género | |
Los YAC fueron diseñados para clonar grandes fragmentos de ADN genómico en levadura. | Se desarrollaron BAC para clonar grandes fragmentos genómicos en Escherichia coli. |
Longitud de inserción | |
YACS puede contener insertos genómicos del tamaño de una megabase.(1000 KB - 2000 KB). | BAC puede transportar insertos de 200-300 kb o menos. |
Construcción | |
YAC El ADN es difícil de purificar intacto y requiere una alta concentración para generar un sistema de vectores YAC. | BAC es fácil de purificar intacto y se puede construir fácilmente. |
Quimerismo | |
Los yacs son a menudo quiméricos. | Los BAC rara vez son quiméricos. |
Estabilidad | |
YAC es inestable. | BAC es estable. |
Modificaciones | |
La recombinación de levadura es muy factible y siempre permanece activa. Por lo tanto, puede generar deleciones y otros reordenamientos en un YAC. | mi. coli La recombinación se evita y se enciende cuando sea necesario. Por lo tanto, reduce los reordenamientos no deseados en BACS. |
Mantenimiento | |
La manipulación de yacs recombinantes generalmente requiere que YAC se transfiera a mi. coli para la manipulación posterior. Por lo tanto, es un proceso laborioso. | La modificación de BAC ocurre directamente en mi. coli. Entonces no hay necesidad de transferencia de ADN. Por lo tanto, el proceso no es laborioso. |
YAC se ha convertido en una herramienta de investigación esencial en los procesos de clonación debido a su capacidad para clonar grandes fragmentos de ADN en el organismo del huésped. Sin embargo, los YAC tienen varias desventajas como vectores como dificultades de construcción, quimerismo, inestabilidad, etc. Por lo tanto, para superar estos problemas, los científicos han desarrollado vectores BAC. BAC se ha construido utilizando regiones específicas de mi. coli cromosoma. Es un vector estable y se puede construir fácilmente. Sin embargo, la longitud del ADN que BAC puede manejar es hasta 20 veces menos que la de YAC. Esta es la diferencia entre YAC y BAC Vector Systems. Hoy en día, BAC es más preferido sobre YAC en los laboratorios.
Referencias
1. Shero, J. H., METRO. K. McCormick, S. mi. Antonarakis y P. Dietero. “Vectores cromosómicos artificiales de levadura para manipulación y mapeo de clones eficientes."Genómica.U.S. Biblioteca Nacional de Medicina, junio de 1991. Web. 25 de mar. 2017
2. Ramsay, M. “Clonación cromosómica artificial de levadura."Biotecnología molecular. U.S. Biblioteca Nacional de Medicina, APR. 1994. Web. 25 de mar. 2017
Imagen de cortesía:
1."BACS Cloning Vectors Chem114a" por Tinastella - (CC BY -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia