¿Cuál es la diferencia entre Coomassie y Silver Training?
El diferencia clave entre Coomassie y manchas de plata es que la tinción de coomassie es una técnica de tinción de proteínas que utiliza una tinción azul brillante de coomassie, mientras que la tinción de astillas es una técnica de tinción de proteínas que utiliza una tinción de plata.
La separación y la identificación de proteínas son pasos críticos en el análisis de proteoma. Necesitan caracterización de proteínas de alta resolución después de la electroforesis en gel. Existen numerosas técnicas de tinción que incluyen diferentes manchas, como colorantes aniónicos (azul brillante de Coomassie), cationes de metal (imidazole-zinc), tintas de plata y colorantes fluorescentes, etc. A veces, también se pueden usar sondas radiactivas. La elección de la técnica de tinción depende de la simplicidad, la disponibilidad de equipos de imágenes en el laboratorio, etc.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la tinción de Coomassie?
3. ¿Qué es la mancha de plata?
4. Similitudes: tinción de coomassie y plata
5. Coomassie vs tinción de plata en forma tabular
6. Resumen -Coomassie vs manchas de plata
¿Qué es la tinción de Coomassie??
La tinción de Coomassie es una técnica de tinción de proteínas que utiliza una mancha azul brillante de Coomassie. Generalmente se llama la técnica de azul coomassie. Coomassie Brilliant Blue es el colorante aniónico más popular. Esta mancha normalmente mide casi todas las proteínas con buena linealidad cuantitativa con sensibilidad media. La mancha azul brillante de Coomassie se une de manera no específica a casi todas las proteínas. Hay dos variantes diferentes de manchas azules de Coomassie: R-250 y G-250. R-250 ofrece tiempos de manchas más cortos, mientras que G-250 está disponible en formulaciones más sensibles y ecológicas.
Figura 01: tinción de coomassie
Los tintes de Coomassie son muy populares en los estudios de espectrometría de masas y los estudios de identificación de proteínas. Además, la mancha de Coomassie Bio-Safe es una formulación no peligrosa de Coomassie Blue G-250 que está actualmente disponible en el mercado. La ventaja de esta formulación es que solo requiere agua para enjuague y desestenimiento. La tinción de Coomassie Bio-Safe ofrece sensibilidad equivalente a Coomassie Blue G-250 convencional, pero mejor que Coomassie Stain R-250. Además, tiene un protocolo de tinción más simple y rápido que el Coomassie Blue G-250 convencional. El inconveniente de la tinción de azul de Coomassie es que es menos sensible en comparación con la tinción de plata. La tinción de azul de Coomassie es aproximadamente 50 veces menos sensible que la tinción de plata. Sin embargo, debido a su simplicidad en la unión, se prefiere en muchos estudios.
¿Qué es la mancha de plata??
La tinción de plata es una técnica de tinción de proteínas que utiliza una mancha de plata. La tinción de plata se usa para manchar los geles de agarosa y poliacrilamida. La tinción de plata de proteína en geles de agarosa fue desarrollada por primera vez en 1973 por Kerenyi y Gallyas. Más tarde, se adaptó para proteínas en geles de poliacrilamida que se usan en SDS-PAGE. Actualmente, la tinción de plata también se usa para manchar ADN o ARN. Para manchar los geles, los geles se incuban con solución de nitrato de plata en este método. Manchas de plata manchas los sitios donde las proteínas están presentes de marrón a negro.
Figura 02: manchas de plata
La intensidad de la tinción de plata depende de la estructura primaria de la proteína. Además, la limpieza de los vasos utilizados y la pureza de los reactivos también puede influir en la calidad de la mancha de plata. Sin embargo, el inconveniente de la tinción de plata es que no puede detectar todas las proteínas, especialmente las glucoproteínas y proteínas con grandes grupos modificados unidos a sus cadenas laterales.
¿Cuáles son las similitudes entre Coomassie y la manchación de plata??
- La tinción de Coomassie y Silver son dos técnicas utilizadas en la tinción de proteínas.
- Pueden manchar tanto las proteínas como el ADN.
- Ambas técnicas de manchas tienen inconvenientes.
- Estas técnicas tienen pasos similares, como la fijación, la tinción y la desestenía.
¿Cuál es la diferencia entre Coomassie y Silver Training??
La tinción de Coomassie es una técnica de tinción de proteínas que utiliza tinción azul brillante de Coomassie, mientras que la tinción de Sliver es una técnica de tinción de proteínas que utiliza tinción de plata. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre Coomassie y Silver Training. Además, la tinción de coomassie es menos sensible que la tinción de plata.
La siguiente infografía enumera las diferencias entre la tinción de Coomassie y la plata en forma tabular para la comparación de lado a lado.
Resumen -Coomassie vs manchas de plata
Para visualizar las proteínas, se puede realizar una reacción química de unión a colorante o de color específica de proteínas. Esto se llama tinción de proteínas. La tinción de Coomassie y Silver son dos técnicas utilizadas en la tinción de proteínas. La técnica de tinción de Coomassie utiliza tinción azul brillante de Coomassie, mientras que la tinción de Sliver usa mancha de plata. Entonces, esta es la diferencia clave entre Coomassie y Silver Training.
Referencia:
1. R, Brunelle JL, verde. "Manchas de azul de Coomassie."Métodos en enzimología, u.S. Biblioteca Nacional de Medicina.
2. Chevallet, Mireille, et al. "Tinción de plata de proteínas en geles de poliacrilamida."Protocolos de la naturaleza, Nature Pub. Grupo, 2006.
Imagen de cortesía:
1. "SDS-Page Coomasie manchado" por PiemMea-Trabajo propio (CC By-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Page AgStain Microsat" de Parinoidmarvin - Trabajo propio (CC BY -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia
