¿Cuál es la diferencia entre Elisa y Elispot?

El diferencia clave Entre Elisa y Elispot es que ELISA es un ensayo inmunosorbente unido a enzimas que determina la concentración total de proteínas de señalización secretadas, mientras que Elispot es un ensayo inmunosorbente ligado a enzimas que detecta células secretoras de citocinas individuales.

ELISA y Elispot son dos ensayos inmunosorbentes ligados a enzimas ampliamente utilizados en medicina, patología vegetal, biotecnología y diferentes industrias farmacéuticas. En estas técnicas, se detecta un analito de proteínas mediante un anticuerpo dirigido contra él. Elisa es el ensayo inmunosorbente de enzima más popular utilizado en laboratorios. Por otro lado, Elispot es un ensayo inmunosorbente ligado a enzimas que no se usa en lugar de ELISA, sino que se usa además de ELISA en Laboratories.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es Elisa?
3. Que es Elispot
4. Similitudes - Elisa y Elispot
5. Elisa vs Elispot en forma tabular
6. Resumen - Elisa vs Elispot

¿Qué es el ensayo de Elisa??

ELISA es un ensayo inmunosorbente unido a enzimas que determina la concentración total de proteínas de señalización secretadas. Es un ensayo de bioquímica analítica ampliamente utilizado que fue descrito por primera vez por Engvall y Perlmann en 1971. Esta técnica utiliza un tipo de inmunoensayo de enzima en fase sólida para detectar la presencia de una proteína específica en una muestra líquida usando anticuerpos dirigidos contra esta proteína específica. Este ensayo es una herramienta de diagnóstico comúnmente utilizada en medicina, patología vegetal y biotecnología.

Mecanismo de prueba ELISA

En la mayor parte de la prueba ELISA, una cantidad desconocida de antígeno se inmoviliza en un soporte sólido (placa de microlitros) al principio. Luego, el anticuerpo primario coincidente se aplica sobre la superficie de soporte sólido. Este anticuerpo forma un complejo con el antígeno (complejo de antígeno-anticuerpo). El anticuerpo primario unido al antígeno puede detectarse mediante un anticuerpo secundario que está vinculado a una enzima a través de la bioconjugación. En el paso final de la prueba ELISA, se agrega una sustancia que contiene el sustrato de la enzima. Si hay una unión adecuada de un anticuerpo primario al antígeno, el sustrato produce un cambio de color detectable. En última instancia, esto cuantifica el antígeno en la muestra.

Figura 01: Diferentes tipos de ELISA

Además, existen diferentes enfoques para ELISA, como Elisa directa e Elisa indirecta. Actualmente, varias pruebas ELISA se utilizan para detectar patógenos humanos como Tuberculosis micobacteriana, rotavirus, virus de la hepatitis B, virus de la hepatitis C, enterotoxina productora mi.coli, VIH y SARS-CoV-2.

¿Qué es el ensayo Elispot??

Elispot es un ensayo inmunosorbente unido a enzimas que detecta células secretoras de citocinas individuales. Cecil Czerkinsky describió por primera vez a Elispot en 1983. Es un tipo de ensayo que se enfoca en medir cuantitativamente la frecuencia de la secreción de citocinas para una sola célula. También se clasifica como una técnica que utiliza anticuerpos para detectar un analito de proteínas biológicas o químicas. El ensayo FluoroSpot es una variación del ensayo ElisPot, que utiliza fluorescencia para analizar múltiples analitos (proteínas más secretas).

Mecanismo de prueba Elispot

En este mecanismo, inicialmente se agregan anticuerpos monoclonales específicos de citoquinas a los pozos de las placas de microlitros inicialmente. Entonces las células deseadas que se observan se agregan a los pozos. Más tarde, las células se incuban. Durante la incubación celular, las células pueden reaccionar a cualquier estímulo y secretar citocina. Las citocinas que han sido secretadas por las células incubadas se unirán a los anticuerpos, ya que las células están rodeadas por anticuerpos monoclonales específicos de citocinas.

Figura 02: Ensayo Elispot

Para detectar estos anticuerpos monoclonales específicos de citocinas, se agregan anticuerpos de detección específicos biotinilados al pozo. Los anticuerpos de detección específicos biotinilados capturan los anticuerpos monoclonales específicos de la citoquina en los pozos. Además, los conjugados de estreptavidina-enzima se agregan a los pocillos para unirse con los anticuerpos de detección. En el paso final, se agregan sustratos específicos a los pozos. Las reacciones de los conjugados y sustratos enzimáticos producen puntos distintos en los pozos. Estos puntos distintos se leen en un lector automatizado de Elispot. En última instancia, esto calculará aún más la frecuencia de la secreción de citocinas.

¿Cuáles son las similitudes entre Elisa y Elispot??

• Ambos son ensayos inmunosorbentes unidos a enzimas.
• Ambos ensayos detectan analitos de proteínas específicos.
• Estos ensayos utilizan anticuerpos específicos para identificar los analitos de proteínas.
• Ambos ensayos usan enzimas y sustratos.
• Se utilizan como herramienta de diagnóstico en laboratorios médicos.

¿Cuál es la diferencia entre Elisa y Elispot??

ELISA es un ensayo inmunosorbente unido a enzimas que determina la concentración total de proteínas de señalización secretadas. Por otro lado, Elispot es un ensayo inmunosorbente ligado a enzimas que mide las células secretoras de citocinas individuales. Entonces, esta es la diferencia clave entre Elisa y Elispot. Además, en la prueba ELISA, el antígeno se inmoviliza en primer lugar en los pozos de microlitro. Por el contrario, en la prueba de Elispot, el anticuerpo se inmoviliza en primer lugar en los pozos de microlitras. Por lo tanto, esta es otra diferencia entre Elisa y Elispot.

La siguiente infografía presenta un análisis detallado de la diferencia entre ELISA y Elispot en forma tabular.

Resumen -Elisa vs Elispot

ELISA y Elispot son dos ensayos inmunosorbentes ligados a enzimas ampliamente utilizados en medicina, patología vegetal, biotecnología e industrias farmacéuticas diferentes. ELISA detecta la presencia de un ligando (proteína) en una muestra líquida usando anticuerpos dirigidos contra el ligando a medir. El ensayo ElisPot es un método ampliamente utilizado para monitorear las respuestas inmunes. Detecta células secretoras de citocinas individuales usando anticuerpos. Es una técnica de inmunoensayo y bioensayo. Por lo tanto, este es el resumen de la diferencia entre Elisa y Elispot.

Referencia:

1. Horlock, Claire. "Ensayo inmunosorbente ligado a enzimas (ELISA)."Sociedad Británica de Inmunología.
2. "Elispot."Temas de ciencias científicas.

Imagen de cortesía:

1. "Tipos de Elisa" de Allan.Richard5093 - Trabajo propio (CC By -SA 4.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Elispot -en" de DADOFBeanandBug: este archivo se derivó de: Elispot.PNG (CC BY-SA 3.0) a través de Commons Wikimedia