¿Cuál es la diferencia entre la filtración de gel y la cromatografía de afinidad?
El Diferencia clave entre la filtración en gel y la cromatografía de afinidad es que la cromatografía de filtración en gel depende de las diferencias en el peso molecular o el tamaño de la muestra de analito, mientras que la cromatografía de afinidad depende de la afinidad de un analito a un ligando inmovilizado.
El término cromatografía en química analítica se refiere al proceso de separación de componentes en una mezcla utilizando diferentes técnicas. La cromatografía es un nombre colectivo que representa una cantidad varios métodos diferentes para la separación.
CONTENIDO
1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la cromatografía de filtración de gel?
3. ¿Qué es la cromatografía de afinidad?
4. Filtración de gel vs cromatografía de afinidad en forma tabular
5. Resumen -Filtración de gel vs cromatografía de afinidad
¿Qué es la cromatografía de filtración de gel??
La cromatografía de filtración en gel es una técnica analítica en la que la separación de componentes depende de la diferencia en el peso o el tamaño molecular. Esta técnica también se conoce como cromatografía de exclusión de tamaño o cromatografía de tinción molecular. La técnica de separación en este proceso depende de la diferente capacidad de las moléculas en la muestra para entrar en los poros del medio de filtración en gel.
En la técnica de filtración de gel, la fase estacionaria contiene cuentas de material hidratado similar a una esponja que tiene poros de dimensiones moleculares que contienen un rango estrecho de tamaños. Si pasamos una solución acuosa que consiste en moléculas de varios tamaños a través de una columna que contiene estos "tamices moleculares", las moléculas que son más grandes que los poros del medio de filtración se mueven rápidamente a través de la columna. En contraste, las moléculas más pequeñas entran en los poros del gel y tienden a moverse lentamente a través de la columna. Las moléculas eluden de la columna en orden de disminución del tamaño molecular. Aquí, el límite de exclusión del gel es la masa molecular de las moléculas más pequeñas que no pueden penetrar los poros de un gel dado.
Existen diferentes tipos de técnicas de filtración de gel, como método de filtración de gel indirecto, filtración en gel en estado estacionario, diálisis de gel, etc. La cromatografía de filtración de gel indirecto es útil en la determinación de hormonas tiroideas libres. La cromatografía de filtración en gel en estado estacionario es una técnica indirecta útil principalmente para la medición de esteroides libres como cortisol, testosterona, etc. La diálisis de Gel Bead, por otro lado, es una modificación de la filtración de gel en estado estacionario que es relativamente más simple.
¿Qué es la cromatografía de afinidad??
La cromatografía de afinidad es una técnica analítica y un método de separación que depende de una interacción vinculante específica entre un ligando inmovilizado y su socio vinculante. Algunos ejemplos incluyen la unión de anticuerpos-antígeno, la unión en enzimas-sustrato y la unión del inhibidor de la enzima. Por lo tanto, esta técnica tiene muchas aplicaciones importantes en la purificación de ácido nucleico, la purificación de proteínas de los extractos celulares y la purificación de la sangre.
En esta técnica, la propiedad más importante es la inmovilización del ligando. Podemos usar varios materiales como acrilatos y gel de sílice para este. Es importante evitar la interferencia estérica de la molécula objetivo al ligando. Además, un inhibidor está unido a la fase sólida. Llamamos a este inhibidor un espaciador. Clásicamente, un espaciador consiste en una cadena de hidrocarburos.
La fase estacionaria de la cromatografía de afinidad contiene el núcleo, el espaciador y el ligando. A veces, también tiene un ion metálico que está acoplado al ligando. La fase sólida más preferida para la fase estacionaria en esta técnica es el gel de agarosa porque se dispensa fácilmente para llenar y empacar la columna con lechos de resina de cualquier tamaño, y es lo suficientemente grande como para que las biomoléculas fluyan libremente hacia las cuentas. Los ligandos pueden unirse covalentemente al polímero de las cuentas de varias maneras. Los compuestos espaciadores más comunes son el bromuro de cianógeno, el epóxido, el epóxido con ácido C6 y el diamín. Por otro lado, el ligando que podemos usar difiere según el objetivo, e.gramo., Antigen-Antígeno, iones de hierro o aluminio-fosfoproteínas, avidina-biotina, glutatión-gst, proteínas etiquetadas con chelator-his, etc.
¿Cuál es la diferencia entre la filtración de gel y la cromatografía de afinidad??
La cromatografía es una técnica analítica importante. La cromatografía de la filtración de gel y la cromatografía de afinidad son dos variaciones importantes de la cromatografía. La diferencia clave entre la filtración en gel y la cromatografía de afinidad es que la cromatografía de filtración en gel depende de las diferencias en el peso molecular o el tamaño de la muestra de analito, mientras que la cromatografía de afinidad depende de la afinidad de un analito a un ligando inmovilizado.
Resumen -Filtración de gel vs cromatografía de afinidad
Existen diferentes tipos de técnicas cromatográficas según su aplicación y la naturaleza de la muestra de analito. La cromatografía de filtración y afinidad de gel son dos tipos de técnicas de este tipo. La diferencia clave entre la filtración en gel y la cromatografía de afinidad es que la cromatografía de filtración en gel depende de las diferencias en el peso molecular o el tamaño de la muestra de analito, mientras que la cromatografía de afinidad depende de la afinidad de un analito a un ligando inmovilizado.
Referencia:
1. "Filtración de gel." Una descripción general | Temas de ciencias.
2. "Cromatografía de afinidad: los principios." Biotecnología de cubo.
Imagen de cortesía:
1. "Cromatografía de filtración de gel" de Matasnavickas - Trabajo propio (CC By -SA 4.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Columna de cromatografía" (CC0) a través de SVG gratis
