¿Cuál es la diferencia entre la levadura uno híbrido y la levadura dos híbridos?

El diferencia clave Entre levadura uno híbrido y levadura dos híbridos es que la levadura un híbrido es un in vitro Ensayo basado para analizar las interacciones de ADN-proteína, mientras que la levadura dos híbridas es un in vitro Ensayo basado para analizar las interacciones proteína-proteína.

Estudiar las interacciones entre las moléculas celulares puede ayudar a definir los sitios de reconocimiento involucrados en la expresión génica y las vías de proteínas. Las interacciones de ADN y proteínas son parte integral de procesos celulares como las modificaciones de ADN y la regulación transcripcional, etc. Por otro lado, las interacciones proteínas y proteínas juegan roles vitales en procesos celulares como la replicación, la transcripción, la traducción y la transducción de señales. Por lo tanto, es de vital importancia identificar estas interacciones de las moléculas celulares a través de diferentes ensayos. Levadura uno híbrido y levadura dos híbridos son dos in vitro Ensayos basados ​​para analizar el ADN-proteína y las interacciones proteína-proteína.

CONTENIDO

1. Descripción general y diferencia de claves
2. ¿Qué es la levadura un híbrido?
3. ¿Qué es la levadura dos híbridas?
4. Similitudes -Levadura One Hybrid y Levadura Two Hybrid
5. Levadura One Hybrid vs levadura dos híbridas en forma tabular
6. Resumen -Levadura One Hybrid vs Levadura Two Hybrid

¿Qué es la levadura un híbrido??

Levadura un híbrido (y1h) es un in vitro Ensayo basado para analizar las interacciones intracelulares de ADN-proteína. Este método fue establecido por primera vez por Wang y Reed en 1993. Desde entonces, ha mostrado un mayor poder en la investigación biológica. En este ensayo, hay dos componentes principales: el cebo de ADN y las proteínas se preparan.

Figura 01: Levadura One Hybrid

En el procedimiento, una secuencia de ADN (cebo de ADN) se cloniza primero aguas arriba de dos reporteros diferentes (His3, LacZ). Estas construcciones de reporteros se integran en el genoma de una cepa de levadura. Los factores transcripcionales se toman como proteínas. Los factores transcripcionales se fusionan con el dominio de activación transcripcional (AD) del factor transcripcional de levadura Gal4 para fabricar proteínas híbridas. Toda esta proteína híbrida se integra en un plásmido antes de introducirlo en la cepa de levadura. Después de la introducción del plásmido recombinante, cuando el factor transcripcional interactúa con el fragmento de ADN, el resto AD activa la expresión del gen indicador (His3or LacZ). La secuenciación de los plásmidos permite la identificación del factor transcripcional que puede unirse al fragmento de ADN. Recientemente, el método híbrido de levadura se utilizó para investigar el diagnóstico de enfermedades. Por lo tanto, en el futuro, este ensayo se utilizará más ampliamente en la investigación científica y los tratamientos médicos.

¿Qué es la levadura dos híbridas??

Levadura dos híbridas (y2h) es un in vitro Ensayo basado para analizar las interacciones de proteínas y proteínas intracelulares. Este método fue encontrado originalmente por Stanley Fields y Ok-Kyu Song en 1989. Esta técnica detecta interacciones proteína-proteína utilizando el factor de transcripción Gal4 de la levadura.

Figura 02: levadura dos híbridas

En este método, dos fusiones (híbridos) se construyen primero usando proteínas de interés: fusionar una proteína con el dominio de unión a ADN (DBD) y fusionando la otra proteína con el dominio activador (AD) del factor de transcripción Gal4. La proteína fusionada con DBD se conoce como cebo, mientras que la proteína fusionada con AD se conoce como presa. En la cepa de levadura, sobre la interacción del cebo y la presa, el DBD y el AD se acercan a la proximidad para generar un factor de transcripción de Gal4 funcional aguas arriba del gen informador. El factor de transcripción funcional activa la expresión del gen reportero. Además, este método se utiliza actualmente para detectar las interacciones de las proteínas de membrana integral en las células de mamíferos.

¿Cuáles son las similitudes entre la levadura uno híbrido y la levadura dos híbridos??

• Levadura uno híbrido y levadura dos híbridos son dos in vitro Ensayos basados ​​para analizar el ADN-proteína y las interacciones proteína-proteína.
• Estos ensayos usan cepas de levadura.
• Ambos ensayos usan el dominio de activación (AD) del factor de transcripción GAL4.
• Usan la expresión del gen reportero (his3 o lacz) para detectar interacciones.
• Tienen cebo y presa.
• Ambos ensayos son muy útiles en la investigación biológica moderna.

¿Cuál es la diferencia entre la levadura uno híbrido y la levadura dos híbridos??

Levadura un híbrido es un in vitro Ensayo basado para analizar las interacciones de ADN y proteínas, mientras que la levadura dos híbridas es un in vitro Ensayo basado para analizar las interacciones proteínas y proteínas. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre la levadura uno híbrido y la levadura dos híbridas. Además, en levadura un híbrido, el cebo es un fragmento de ADN, y la presa es una molécula de proteína. Por otro lado, en levadura dos híbridas, tanto el cebo como las presas son moléculas de proteínas.

La siguiente infografía enumera las diferencias entre la levadura un híbrida y la levadura dos híbridas en forma tabular para la comparación de lado a lado.

Resumen -Levadura One Hybrid vs Levadura Two Hybrid

Levadura uno híbrido y levadura dos híbridos son dos importantes in vitro ensayos basados. Levadura un híbrido es un in vitro Ensayo basado para analizar las interacciones de ADN y proteínas, mientras que la levadura dos híbridas es un in vitro Ensayo basado para analizar las interacciones proteínas y proteínas. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre la levadura uno híbrido y la levadura dos híbridas.

Referencia:

1. Reece-Hoyes, John S, y Alertha J M Walhout. "Ensayos de una híbrida de levadura centrada en genes."Métodos en biología molecular (Clifton, N.J.), U.S. Biblioteca Nacional de Medicina, 2012.
2. Shaffer, DR. Catherine. "Aplicaciones de detección de dos híbridos de levadura."Noticias, 26 de febrero. 2019.

Imagen de cortesía:

1. "Figura 17 05 01" por CNX OpenStax - (CC por 4.0) a través de Commons Wikimedia
2. "Dos ensayo híbrido" de Anna - Trabajo propio (CC By -SA 3.0) a través de Commons Wikimedia